1997 Fiscal Year Annual Research Report
平滑筋細胞由来遊走因子(SDMF)の遺伝子発現機構と動脈硬化
Project/Area Number |
09671026
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Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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Research Institution | Chiba University |
Principal Investigator |
森崎 信尋 千葉大学, 医学部, 講師 (40174411)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
斎藤 康 千葉大学, 医学部, 教授 (50101358)
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Keywords | 平滑筋細胞 / SDMF / フェノタイプ / 遊走 / オートクリン / 動脈硬化 |
Research Abstract |
1.まずフェノタイプとSDMF発現の関係を検討した。平滑筋細胞はウサギ大動脈より培養した。フェノタイプのうち収縮型は正常大動脈中から酵素法にて単利培養し初代を用いた。合成型のうち。中膜由来平滑筋細胞には正常大動脈中膜からエクスプラント法にて継代培養した。内膜由来平滑筋細胞はウサギに1%高コレステロール食を3ヶ月投与し、大動脈に動脈硬化巣を作成しそこより培養した。平滑筋細胞由来遊走因子(SDMF)は、収縮型には発現していなかった。一方、合成型には発現していたが内膜由来平滑筋細胞で中膜由来平滑筋細胞に比べて、有意に強く発現していた。 2.ラットSDMFcDNAのN末端に近い部位でプライマーを作成して動脈硬化巣における発現をまずRT-PCR法で検討した。ウィスター系ラット(400g)の頚動脈にバルーンカテーテルを挿入し、3回擦過した。カテーテルで内膜障害を起こす前にはSDMF遺伝子は発現していなかった。これは、上記の収縮型平滑筋細胞にはSFMFが発現していないという成績と一致する。障害後3日後ではSDMF遺伝子の発現がみられた。この時期はまだ内膜肥厚がみられていないが平滑筋細胞の一部が合成型(中膜由来平滑筋細胞と類似)になっているので上記の成績と一致する。更に、障害2週後では強くSDMF遺伝子が発現していた。これは上記の内膜由来平滑筋細胞の発現動態と一致した成績である。 3.現在アンチセンスを用いてin situ hybridizationを試行中である。更に、作成中の抗SDMF抗体が利用できれば免疫組織染色も可能となる予定である。
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[Publications] Ueng H, Haruno A, Morisaki N et al.: "Local expression of c-type natriupetio peptide marfeedly suppressos neointmal formation vn,rat injured arteries through,an autocrine /paracrine loap" Circulation. 96. 2272-2279 (1997)
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[Publications] Tamura K, …, Morisaki N: "Secretion (5-hydroxytryplanine, 5HT)enhances migration of aortic smooth muscle cells through 5-H-Tz receptors" Atherosclerosis. 132. 139-143 (1997)
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[Publications] Higashi T, …, Morisaki N et al.: "The receptor for advanced glycation and products mediates the chemotaxis of rabbit smooth muscle cells" Diabetes. 46. 463-472 (1997)
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[Publications] Kanzaki T, Shiina R, Saito Y, Zardi L, Morisaki N: "Transforming growth factors recept or and fibronction expressions in aortic smooth muscle cells in diabetic rats" Diabetologia. 40. 383-391 (1997)
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[Publications] Ikeda M, …, Morisaki N et al: "Natriuretic peptidl family as a novel antimigration factor of vascular smooth muscle cells" Arterloscler Thromb Vasc Biol. 17. 731-736 (1997)