1997 Fiscal Year Annual Research Report

造血幹細胞を標的とした新たなレトロウイルスベクター系の作成と改良

Research Project

Project/Area Number	09671106
Research Category	Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
Research Institution	Kyoto University
Principal Investigator	伊藤克彦京都大学, 医学研究科, 講師 (90281097)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	金子嘉志京都大学, 医学研究科, 助手 (40252465) 藤田潤京都大学, 医学研究科, 教授 (50173430)
Keywords	造血幹細胞 / レトロウイルス・ベクター / 遺伝子導入
Research Abstract	本研究では、2年間で以下の3点を行うこととした。 SFFVのLTRとMESVベクターのleaderの組み合わせを持つ、新たに得られたレトロウイルスベクターが、長期にin vitro、in vivoで効率良く遺伝子発現をすることを確認する。ストローマ細胞を用いた、新たなパッケージング細胞を樹立し、その有用性をin vivoの系で検定する。このベクターが、VSVG蛋白とシュードタイプウイルスを創り得るか否かを検定する。平成9年度に以下のことを成した。 1。SFFVのLTRとMESVベクターのleaderの組み合わせを持つ、新たに得られたレトロウイルスベクターのパッケージング細胞株、ウイルス産生クローンの樹立既存のNIH/3T3細胞由来のパッケージング細胞株を用いて、新たに得られたレトロウイルスベクターの基本骨格を持つ、種々のレトロウイルスベクターのウイルス産生クローンを樹立し、高いウイルス活性の産生を認めたクローンを選択した。 2。ストローマ細胞を用いた、パッケージング細胞/ウイルス産生クローンの樹立ストローマ細胞株(MS-5)に、gag/pol遺伝子の発現ベクター及びマウスモロニ-ウイルス(MuMoLV)のenv遺伝子の発現ベクターを遺伝子導入した。現在、パッケージング機能のすぐれたクローンを選別中である。 3。VSVG蛋白の発現ベクターの作成水泡性口内炎ウイルス(VSV:インヂィアナ株、ニュージャージー株)産生細胞より得たmRNAより、RT-PCR法を用いてG蛋白をコードするcDNAを得た。このcDNAを誘導型一過性発現ベクターにクローニングし、VSVG蛋白の発現ベクターを作成した。現在、この発現ベクターを用いた、VSVG蛋白/シュードタイプベクターのパッケージング細胞を作成中である。

Research Products
(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Nishiyama H: "A glycine-rich RNA-binding Protein mediating cold-inducible supression of mammation cell growth" J.Cell Biol. 137. 899-908 (1997)
[Publications] Baum C: "The potent enhancer activily of SFFVp in hematopoietic cells i governed by a binding-site for sp.1 in the upstream control veg and by a unique enhancer core-motif creating an exclusive farg for PEBP/Cbf." J.Virology. 71. 6323-6331 (1997)
[Publications] Itoh K: "The role of soluble growth factors in inducing Transient growth and clonal extinction of stroma cell-dependent erythroblastic leukemia cells" Leukemia. 11. 1753-1761 (1997)
[Publications] Nishiyama H: "Cloning and characterization of human CIRP(cold-inducible RNA binding protein)cDNA and chromosomal assignment of the gene" Gene. 204. 115-120 (1997)
[Publications] Nishiyama H: "Decreased expression of cold-induced RNA-binding protein(CIRP)in male germ cells at elevated Temperatare" Am J. Path. 152. 289-296 (1997)
[Publications] O′prey J: "Signaling mechanisms involved in long-term growth of ELM erythroleukaemia cells" Blood. (in press).

1997 Fiscal Year Annual Research Report

造血幹細胞を標的とした新たなレトロウイルスベクター系の作成と改良

Principal Investigator

伊藤 克彦 京都大学, 医学研究科, 講師 (90281097)

Research Products

[Publications] Nishiyama H: "A glycine-rich RNA-binding Protein mediating cold-inducible supression of mammation cell growth" J.Cell Biol. 137. 899-908 (1997)

[Publications] Baum C: "The potent enhancer activily of SFFVp in hematopoietic cells i governed by a binding-site for sp.1 in the upstream control veg and by a unique enhancer core-motif creating an exclusive farg for PEBP/Cbf." J.Virology. 71. 6323-6331 (1997)

[Publications] Itoh K: "The role of soluble growth factors in inducing Transient growth and clonal extinction of stroma cell-dependent erythroblastic leukemia cells" Leukemia. 11. 1753-1761 (1997)

[Publications] Nishiyama H: "Cloning and characterization of human CIRP(cold-inducible RNA binding protein)cDNA and chromosomal assignment of the gene" Gene. 204. 115-120 (1997)

[Publications] Nishiyama H: "Decreased expression of cold-induced RNA-binding protein(CIRP)in male germ cells at elevated Temperatare" Am J. Path. 152. 289-296 (1997)

[Publications] O′prey J: "Signaling mechanisms involved in long-term growth of ELM erythroleukaemia cells" Blood. (in press).

伊藤克彦京都大学, 医学研究科, 講師 (90281097)