1997 Fiscal Year Annual Research Report
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09671114
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Research Institution | Okayama University |
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Principal Investigator |
品川 克至 岡山大学, 医学部附属病院, 助手 (00273988)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
竹中 克斗 岡山大学, 医学部附属病院, 助手
石丸 文彦 岡山大学, 医学部附属病院, 助手 (50284097)
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| Keywords | 造血幹細胞 / 同種骨髄移植 / ホ-ミング / コロニー / 接着因子 / 骨髄内皮細胞 |
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| Research Abstract |
造血幹細胞の骨髄へのhoming機構解明を目的として、骨髄移植後の造血幹細胞の動態と特徴について検討している。(1)ヒトにおいて、同種骨髄移植後末梢血中に循環している造血幹細胞をCFU-GM assayとHPP-CFC assayで検討したところ、移植前には認められなかった末梢血中CFU-GMがday1で6〜73/10mlが認められ、day5で消失し、day14より再び認められた。またDay1末梢血中の骨髄球系コロニーのうちHPP-CFCの占める割合は移植骨髄と比べ有意に高かった(44.3+10.4% vs 11.8+2.1%,n=5,P<0.01)。PCRによる解析では、day1末梢血由来HPP-CFCはdonor typeであった。このHPP-CFC由来コロニーの90%以上から2次コロニーの形成が観察された。Flow-cytometryによる解析では、day1末梢血中のCD34陽性細胞上のCD38陰性率は移植骨髄細胞と比較し、61.0+16.5% vs 9.3+3.5%(n=7,P<0.01)、VLA-4陰性率は81.7+11.4% vs 53.8+7.4%(n=5,P<0.01)と有意に高く、以上より移植後分化傾向のある幹細胞が早期に末梢血より消失し、未分化な幹細胞がより長く末梢血中に留まる傾向がうかがわれた。(2)C57BLマウスにおけるhoming efficiencyに対する接着因子等の影響を検討し、造血幹細胞の骨髄内皮細胞の認識機構に関する解析を開始した。マウスの骨髄移植における移植後24hr以内のseeding efficiencyの詳細な検討を行った報告はないので、まず移植後30min、1hr、2hr、6hr、12hr、18hr、24hrにおける骨髄(femur)中及び末梢血中の造血幹細胞をCFU-S assayとCFU-GM assayで検討した。移植後24hr以内では造血幹細胞は、骨髄中及び末梢血中でなだらかな減少曲線を描き、seeding efficiencyとしては30min:0.0099、2hr.0.0008という結果を得た。今後はこれらの曲線をコントロールとし、幹細胞上に発現しているL-selectin、VLA-4、VLA-56、MAC-1、LFA-1、c-kit、CD34、複合糖鎖、proteoglycanなどを阻害した細胞でマウスに骨髄移植を行ない、seeding efficiencyに対する影響を検討してゆく予定である。
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Research Products
(4 results)
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[Publications] Yano T, et al.: "G-CSF-induced mobilization of peripheral blood stem cells for allografting : Comparative study of daily single versus double dose of G-CSF" Int J Hematol. 66 (2). 169-178 (1997)
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[Publications] Katayama, et al.: "The effects of a simplified method for cryopreservation and thawing procedures on peripheral blood stem cells" Bone Marrow Transplant. 19. 283-287 (1997)
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[Publications] Nawa Y, et al.: "Respones of G-CSF mobilized peripheral blood mononuclear cells to alloantigen stimulation" Blood. 90. 1716-1718 (1997)
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[Publications] Teshima T, et al: "Circulating immature cell counts on the harvest day predict the yields of CD34+ cells collected after G-CSF plus chemotherapy induced mobilization of peripheral blood stem cells" Blood. 89. 4660-4661 (1997)
