1997 Fiscal Year Annual Research Report
細胞障害性T細胞誘導peptideを用いた移植後CMV感染症のワクチン療法の開発
Project/Area Number |
09671245
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Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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Research Institution | Wakayama Medical University |
Principal Investigator |
角田 卓也 和歌山県立医科大学, 医学部, 助手 (30275359)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
岩橋 誠 和歌山県立医科大学, 医学部, 助手 (70244738)
山上 裕機 和歌山県立医科大学, 医学部, 講師 (20191190)
谷村 弘 和歌山県立医科大学, 医学部, 教授 (10026990)
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Keywords | CMV / CTL / ワクチン療法 / peptide / 移植 |
Research Abstract |
効率よく確実にCTLを樹立するため,CMVはfibroblastには感染するがT細胞には感染しない特性を利用し,CMVを感染させた自己のfibroblastを刺激細胞として用い,CMV特異的CTLを誘導した。さらに,limiting dilusion法で,CMVpp65特異的CTLクローンを樹立した。樹立したCTLクローンが,CMVpp65特異的か否かを,full length pp65rVacに感染した自己のEBV immortalized cell(LCL)を標的細胞としてクローム遊離試験(CRA)で決定し,同様にHLA class I拘束性をfull length pp65rVacに感染した種々のLCLに対する障害活性および抗HLA class I抗体によるblocking assayを施行したところ,HLA B35拘束性pp65特異的CTLクローンであった。 一方,pp65をN末端より100アミノ酸ごと制限酵素でtruncateしたmutation formを作り,vaccinia virusのvectorであるpSC11MCSにligateし種々のrVacをhomologous recombinationで樹立した。full length(606)-pp65 rVac,458(Not I site)-pp65 rVac,383(Hind III site)-pp65 rVac,316(Sma I site)-pp65 rVac,225(BstEII site)-pp65 rVac,122(BsrBI site)-pp65 rVac,()-pp65 rVacを樹立した。また,T7tag認識シークエンス(ATGGCTAGCATGACTGGTGGACAGCAAATGGGT)を組み込み,樹立したrVacのタンパク発現をT7 tag抗体を用いWestern blotting法で現在,確認中である。
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[Publications] Takuya Tsunoda et al.: "Clinical efficacy of adoptive immunotherapy by IL-4 activated tummor-infiltrating lymphocytes in patients with advanced cancer" International Journal of Clinical Oncology. 2・4. 202-207 (1997)
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[Publications] Hiroki Yamaue et al.: "Clinical effects of chemoimmunotherapy for patients with peritoneal carcinomatosis" Oncology Report. 4. 583-589 (1997)
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[Publications] Kohhei Noguchi et al.: "Enhancement of tumor cell susceptibility to tumor-infiltrating lymphocytes by cisplatine" Journal of Cancer Research Clinical Oncology. 123. 345-351 (1997)
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[Publications] 角田卓也他: "ペプタイドと臨床免疫「臨床編」" 癌治療と宿主. 10・1. 99-104 (1998)
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[Publications] 角田卓也他: "最近のグラム陽性球菌の薬剤耐性化(第1報).近畿地区におけるMRSAに関するアンケート調査成績" 日本感染症学会雑誌. 71. 1-5 (1997)
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[Publications] 角田卓也他: "グラム陽性球菌の薬剤耐性における最近の動向(第2報).近畿地区におけるペニシリン耐性肺炎球菌に関するアンケート調査成績" 日本感染症学会雑誌. 71. 6-10 (1997)