2000 Fiscal Year Annual Research Report
肺癌患者の肺静脈血中の腫瘍抑制遺伝子,接着分子の検討
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09671258
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| Research Institution | JIKEI UNIVERSITY SCHOOL OF MEDICINE |
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Principal Investigator |
秋葉 直志 東京慈恵会医科大学, 医学部, 講師 (10192907)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
尾高 真 東京慈恵会医科大学, 医学部, 助手 (20233554)
塩谷 尚志 東京慈恵会医科大学, 医学部, 助手 (70226108)
佐藤 修二 東京慈恵会医科大学, 医学部, 講師 (80205921)
朝倉 潤 東京慈恵会医科大学, 医学部, 助手 (80287193)
高木 正道 東京慈恵会医科大学, 医学部, 助手 (70236199)
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| Keywords | 肺癌 / FHIT |
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| Research Abstract |
【目的】原発性非小細胞肺癌手術の切除標本を用いてFHIT geneの解析を行い、臨床病期、予後との相関を検討しFHIT geneの非小細胞肺癌に対する影響を検討する。【方法】A:1.原発性非小細胞肺癌手術の切除標本を液体窒素で凍結する。2.腫瘍部分、リンパ節を凍結保存後、Fast trak kitを用いmRNAを抽出する。3.cDNA cycle kitを用いてReverse Transcriptase処理しcDNAを作製する。4.FHIT遺伝子の特異的PCR primerをデザインし、cDNAを鋳型としてRT-PCRを行い、FHIT geneを増幅する。B:1.凍結標本からISOGENを用いてRNAを抽出する。2.FHIT geneを増幅する。3.PCR産物を電気泳動し、エチジウムブロマイド染色し異常バンドを検出する。4.Splicing errorを同定する。C:異常の頻度と原発性非小細胞肺癌の臨床病期、予後、病理学的所見との関係を検討する。【結果】1.方法Aで検体5例に対してPCRを行ったが、FHIT geneの異常は認めなかった。2.方法Bで8例の検体に対してはFHIT geneの増幅に成功したが、異常バンドは検出できなかった。3.更に方法Bで7例を行ったが異常バンドは検出できなかった。【考察】方法AではPCRにては増幅しなかった。検体採取方法(凍結、保存)に欠陥があり、RNAの破壊がみられ、RNA量が不足したことが原因と考える。方法BではPCRでFHIT geneは増幅しており、RNAの単離方法は正しいと思われる。異常バンドの検出ができなかったのは、検体中の正常組織と癌細胞のpopulationの問題、腫瘍組織中の正常遺伝子が優位に検出されていることから実験上のエラーの可能性があり、原発性非小細胞肺癌にFHIT geneが関与しないと判断するまでには達しなかった。
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[Publications] 尾高真: "I期非小細胞肺癌におけるVEGFおよびp53蛋白発現の比較検討"肺癌. 40・1. 11-15 (2000)
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[Publications] 秋葉直志: "骨性胸壁切除後の再検手術"手術. 54・2. 203-208 (2000)
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[Publications] 佐藤修二: "未確診肺野小型腫瘤性病変に対する胸腔鏡下肺生検の有用性に関する検討"日本胸部臨床. 59・5. 375-380 (2000)
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[Publications] 高木正道: "光重合性合成・吸収性ハイドロゲル(ADVASEAL^<TM>)を用いた肺断端処理法"日本呼吸器外科学会雑誌. 14・6. 690-693 (2000)
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[Publications] 高木正道: "光重合成・吸収性ハイドロゲル(ADVASEAL^<TM>)の使用経験-臨床応用"胸部外科. 53・11. 951-953 (2000)
