1999 Fiscal Year Annual Research Report
乳癌に発現するCDK variannt のクローニングと機能分析
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09671263
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| Research Institution | St.Marianna University School of Medicine |
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Principal Investigator |
福田 護 聖マリアンナ医科大学, 医学部, 助教授 (50081724)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
緒方 晴樹 聖マリアンナ医科大学, 医学部, 助手 (60267581)
太田 智彦 聖マリアンナ医科大学, 医学部, 講師 (60233136)
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| Keywords | 乳癌 / 細胞周期 / CDK2ΔT / CDK2ΔT / variant / T-loop |
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| Research Abstract |
CDC2にT-loop欠損型variant (CDC2ΔT:本研究計画調書ではΔCDC2と記載)を認めたことから、研究代表者らは他のCDKファミリーに同様なvariantが存在するかどうかを検討した。新鮮乳癌組織よりmRNAを抽出し、RT-PCR法にてCDK2のcDNAを増幅したところ、野生型とともにT-loop欠損型CDK2 variantがクローニングされた(CDK2ΔT:DNAデータバンク#AB 012305)。CDK2ΔTはT-loopのC末端側の一部を含む、Val163からAsp196の34基のアミノ酸を欠失していた。CDK2ΔTのC末端にHA-tagをつけ、pcDNA3 vectorに挿入し、pcDNA3-CDK2ΔT-HAプラスミドを作成した。CDK2ΔT-HAをCyclin A,Cyclin E1あるいはp21 CDK inhibitor とともにHela細胞に一過性発現させ、それぞれのタンパク質との結合を免疫沈降ーウェスタンブロット法にて解析した。CDK2ΔTはCDC2ΔTと同様、Cyclin A,Cyclin E1およびp21と共沈しなかった。これらvariantsの生物学的な意義は今のところ不明である現在、CyclinやCDK inhibitor以外のCDK 結合タンパク質との相互作用により、dominant negative として働くかどうかを検討中である。
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Research Products
(2 results)
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[Publications] Ohta T. et al: "T-loop deletion of CDC2 from breast cancer tissues eliminates binding tocyclin Bland cycli-dependent kinasa inhibitor"canser Res.. 58. 1095-1098 (1998)
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[Publications] 西川 徹 他: "乳癌よりクローニングされたT-loop 部分欠損型 CDK2 variant"聖マリアンナ医科大学雑誌. 26. 359-366 (1998)
