1999 Fiscal Year Annual Research Report
アデノウイルス発現ベクターを用いたP16遺伝子導入による食道癌,膵癌治療の試み
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09671280
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| Research Institution | Chiba University, School of Medicine |
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Principal Investigator |
小林 進 千葉大学, 医学部, 講師 (50234828)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
白澤 浩 千葉大学, 医学部, 教授 (00216194)
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| Keywords | p16 / アデノウイルスベクター / 膵癌 / 遺伝子導入 / 食道癌 |
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| Research Abstract |
p16^<INK4a>発現アデノウイルスベクターの膵癌細胞における発現と細胞増殖抑制効果
p16^<INK4a>cDNA(0.8kb)をPCR cloning法によりcloningし、これをコスミッドカセットDNAのSwa-1 siteにIn vitro package法により組み込み、さらに、これをEco T221にて切断された親アデノウイルスと293細胞にco-transfectし、組換えウイルスを分離しp16^<INK4a>発現アデノウイルスベクターを作製した。P16^<INK4a>のhomozygous deletionが確認された膵癌培養細胞株;MIAPaca-2に対し、このP16^<INK4a>発現アデノウイルスベクターによりp16^<INK4a>遺伝子導入を行った。実際にp16^<INK4a>遺伝子導入されたMIAPaca-2にp16^<INK4a>遺伝子のRNAレベル、タンパクレベルの高度の発現が見られることを確認した。P16^<INK4a>発現が確認された膵癌培養細胞株;MIAPaca-2とコントロールとしてのアデノウイルス添加されたMIAPaca-2の細胞増殖曲線を比較したがp16^<INK4a>発現によりMIAPaca-2の細胞増殖は有意に抑制された。
p16^<INK4a>発現アデノウイルスベクターによる食道癌細胞増殖抑制効果
食道癌細胞(TT,TTn)において、同様の検討を行ったが食道癌細胞においてはp16^<INK4a>発現アデノウイルスベクターによる増殖抑制効果は確認できなかった。
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