ハムスター膵胆管合流異常モデルの発癌過程における癌遺伝子および癌抑制遺伝子の関与の検索

1997 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 09671347
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• Research Institution: Kawasaki Medical School
• Principal Investigator: 山本 康久 川崎医科大学, 医学部, 助教授 (10122459)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 木元 正利 川崎医科大学, 医学部, 助教授 (50153226) ; 角田 司 川崎医科大学, 医学部, 教授 (00110841)
• Keywords: 膵胆管合流異常 / ハムスター / K-ras遺伝子 / p53遺伝子 / BOP / 肝外胆管癌 / 膵管癌 / 胆嚢・十二指腸吻合

Research Abstract

膵胆管合流異常には胆管系の悪性腫瘍が合併することが知られている。ハムスターにおいて開発された胆嚢十二指腸吻合及び総胆管結紮による膵胆管合流異常モデルは,N-nitrosobis(2-oxopropyl) amine (BOP)を投与すると,膵管癌,肝内胆管癌のみならず肝外胆管癌,胆嚢癌が誘発される。今回は膵胆管合流異常モデルでの発癌過程における遺伝子変異の関与を検索する目的で,肝外胆管癌,膵管癌のK-ras, p53遺伝子の点突然変異を調べた。【材料及び方法】6週齢の雌性シリアンゴールデンハムスターに,エーテル麻酔下に胆嚢十二指腸吻合及び総胆管結紮切離を施行した。術後4週目より週1回10mg/kgのBOPを9回皮下投与した。初回BOP投与後,20週目に屠殺し,肉眼的に明らかな膵腫瘍及び肝外胆管癌の一部を組織学的検索のためH-E染色用にホルマリン固定し,一部は遺伝子学的検索のため,液体窒素にて凍結保存した。K-ras, p53遺伝子点突然変異はRT-PCR-SSCP法にて解析し,異常バンドについてはdirect sequence法にて塩基配列を調べた。【結果】肝外胆管癌は55.9%,膵管癌は67.6%の頻度で組織学的に認められた。肉眼的に明らかな肝外胆管癌8例,膵管癌11例につきK-ras, p53遺伝子変異を検索した。K-ras遺伝子変異は,肝外胆管癌で8例中6例(75%),膵管癌で11例中6例(54.5%)に認められた。direct sequence法では全例にK-ras exon 1のcodon12にGGT→GATの点突然変異が証明された。それに対し,p53 exon5-7には遺伝子変異は認められなかった。以上より,膵胆管合流異常の発癌過程においては,K-ras mutationは重要な役割を果たすが,p53の関与は少ないことが示唆された。

Research Products

• [Publications] 岩本末治: "高齢者の周術期ケア.高齢者消化器外科における手術適応;術式の選択" 消化器外科Nursing. 2・1. 66-70 (1997)
• [Publications] 伊木勝道: "孤立性小腸転移を来した黒色種の1例" 日臨外医会誌. 58・2. 415-418 (1997)
• [Publications] 岩本末治: "膵嚢胞の手術" 外科治療. 76・5. 837-840 (1997)
• [Publications] 岩本末治: "5-fluorouracil/cisplatin (FP)療法が無効でMethotrexate/5-fluorouracil交代療法が奏効した進行胃癌の1例" 癌と化学療法. 24・13. 2005-2009 (1997)
• [Publications] Toshimitsu Majima: "Mutations of K-ras but not P53 genes in biliary duct and pancreatic duct carcinomas induced in hamster by cholecystoduodenostomy with dissection of the common duct followed by N-nitrosobis (2-oxopropyl) amine" Cancer Letters. 118. 47-53 (1997)
• [Publications] Toshimitsu Majima: "Inhibitory effects of β-carotene, plam carotene, and green tea polyphenols on pancreatic carcinogenesis initiated by N-nitrosobis (2-oxopropyl) amine in Syrian golden hamsters." Pancreas. 16・1. 13-18 (1998)
• [Publications] 角田 司: "専門医のための消化器外科学レビュー'97-最新主要文献と解説" 総合医学社,東京, 5 (1997)
• [Publications] 角田 司: "新外科学大系、追補2 肝・胆・膵の外科、外科と分子生物学" 中山書店,東京, 13 (1997)
• [Publications] Tsukasa Tsunoda: "Surgical Diseases of the Pancreas" Williams & Wilkins, Baltimore, Philadelphia, London, Paris, Bangkok, Buenos Aires, Hong Kong Munich, Sydney, Tokyo, Wroclaw, 10 (1998)