薬剤感受性遺伝子導入による悪性脳腫瘍に対する遺伝子治療

1997 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 09671425
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• Research Institution: Okayama University
• Principal Investigator: 田宮 隆 岡山大学, 医学部附属病院, 講師 (50252953)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 小野 恭裕 岡山大学, 医学部, 助手 (40294409) ; 古田 知久 岡山大学, 医学部附属病院, 講師 (30181457) ; 松本 健五 岡山大学, 医学部, 助教授 (10190521)
• Keywords: retrovirus vector / adenovirus vector / gene therapy / brain tumors / E.coli gpt gene / chemosensitivity gene / 6-thioxanthine

Research Abstract

平成9年度の研究とその実績について報告する。
1)6-thioxanthine/E.coli gpt遺伝子療法の研究
レトロウイルスベクター産生細胞を用いた遺伝子導入により、6-thioxanthine/E.coli gpt遺伝子療法の有効性がin vitroで認められた。次に、9Lラット脳腫瘍モデルを用いて検討すると、レトロウイルスベクター産生細胞を用いた遺伝子導入によりE.coli gpt遺伝子が脳腫瘍内に導入され、6-thioxanthine投与による有効性が有意差をもって認められた。この結果は、Human Gene Therapyに掲載された。
2)アデノウイルスベクターの改良、開発
脳腫瘍細胞に対する遺伝子導入効率を高めるために、強力なCAGプロモーター用いたアデノウイルスベクター(AdexCALacG)を作成し、脳腫瘍細胞における遺伝子導入を検討した。in vitroでの遺伝子導入効率は、培養9L細胞では、MOI=25以上で2日以内に100%の導入が得られた。他のグリオーマ細胞株における検討でも9L細胞とほぼ同様の結果を得た。ラット脳腫瘍モデルでの検討では、AdexCALacZの腫瘍内注入4日後には、腫瘍全域にLacZ染色細胞が認められ、特に腫瘍辺縁部は濃染した。遺伝子発現は浸潤腫瘍細胞のみならず、腫瘍に接する正常脳細胞(グリア細胞、神経細胞)の一部にも認められた。
上記結果をもとに、種々の薬剤感受性遺伝子を組み込んだ改良型アデノウイルスベクターを作成し、そのベクターを用いた脳腫瘍培養細胞での薬剤感受性遺伝子治療の検討を平成10年度に行う予定である。

Research Products

• [Publications] Yasuhiro Ono: "Accumulation of wild-type p53 in astrocytomas is associated with increased p21 expression." Acta Neuropathologica. 94 (1). 21-27 (1997)
• [Publications] Yasuhiro Ono: "Regression of experimental brain tumors with 6-thioxanthine and Esherichia coli gpt gene therapy." Human Gene Therapy. 8・ 17. 2043-2055 (1997)