1998 Fiscal Year Annual Research Report
パルボウイルスB19による胎児水腫発症機構としてのアポトーシスの分子生物学的解析
Project/Area Number |
09671658
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Research Institution | Tohoku University |
Principal Investigator |
八重樫 伸生 東北大学, 医学部附属病院, 講師 (00241597)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
上原 茂樹 東北大学, 医学部附属病院, 講師 (10168651)
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Keywords | パルボウイルス / B19 / 母子感染 / 胎児水腫 / アポトーシス |
Research Abstract |
1、 平成9年度には、Bl9ウイルスの非構造蛋白NSlを誘導発現する細胞株を樹立し、NSl蛋白が直接アポトーシスを誘導することを示した。平成10年度はまず遺伝子組み替えによってNSI蛋白がATP結合能を失うように変異NSl遺伝子を作製し、前年度と同様な方法で培養細胞に遺伝子導入し、変異NSl蛋白を誘導発現する細胞株を樹立した。変異NSl蛋白が発現しても細胞はアポトーシスを起こさなかった。すなわちアポトーシス誘導にはNSl蛋白のATP結合部位が重要であることを示した。 2、 Bl9感染による細胞障害機構がin vitroのみでなく生体内でも起こっている現象であることを確認するため、胎児水腫で死産となった10症例の組織を集積して、胎児赤芽球がアポトーシスを起こしているかどうかを検討した。組織をTUNEL法で染色したところ、血管内に陽性細胞が散見された。組織をTUNEL法と抗Bl9単クロン抗体で二重染色することによって感染細胞がアポトーシスを起こすことを証明した。 3、 次にアポトーシス誘導の分子機構を解明する目的で、組織を種々のアポトーシス関連因子に対する抗体を用いて免疫染色した。カスペース3に対する抗体では感染細胞は陽性となったが、カスペース1に対する抗体では陰性であった。前年度に作製したNSI蛋白を発現する細胞でもやはりカスペース3のみが陽性となり、この細胞培養系にカスペース3阻害剤を添加することによってアポトーシスが抑制された。このようにBl9感染によって起こる赤芽球のアポトーシス機構にはカスペース3が重要な役割を担っていることが示された。一方FASやパーフォリン、グランザイム、Bcl-2に対する抗体では陽性所見はみられなかった。
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Research Products
(7 results)
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[Publications] N.Yaegashi: "The incidence of, and Factors Leading to, Parvoriums B19-related Hydrops Fetalis Following Maternal Infection." J.Infect.37. 28-35 (1998)
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[Publications] N.Yaegashi: "Serologic Study of Human Parvoriums B19 Infection in Pregnancy in Japan." J.Infect.38 in press. (1999)
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[Publications] S.Moffatt: "Human Parvorius B19 Noustructural (NSI) Protein induces Apoptosis in Erythroid Lineage Cells." J.Virol.72. 3018-3028 (1998)
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[Publications] 八重樫伸生: "パルボウイルスB19の母子感染-胎児水腫の発症機転を中心に-" 日本産科婦人科学会雑誌. 50. 569-580 (1998)
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[Publications] 八重樫伸生: "パルボウイルスB19母子感染における胎児障害機構" 産婦人科の実際. 47. 1169-1176 (1998)
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[Publications] 中里浩樹: "妊婦におけるヒトパルボウイルスB19抗体陽性率の変化" 周産期医学. 28. 1241-1243 (1998)
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[Publications] 八重樫伸生: "ペリネイタルケア1999新春増刊" メディカ出版, 10 (1999)