1998 Fiscal Year Annual Research Report
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09671662
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| Research Institution | Yamagata University |
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Principal Investigator |
齊藤 英和 山形大学, 医学部, 助教授 (90125766)
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| Keywords | テロメア / テロメラーゼ活性 / 卵巣機能 / 顆粒膜細胞 / 卵 |
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| Research Abstract |
テロメラーゼ活性は1994年にテロメラーゼ反応産物をPCR法にて増幅して検出するTRAP法が発表されて以来、様々な組織及び細胞で測定されるようになった。テロメラーゼ活性の強い細胞は、不死化能、無限増殖能を獲得した細胞と考えられている。癌組織では癌の診断および治療への応用にむけ多くの研究が進められている。しかし高度に増殖能を有する生殖細胞に関しての研究、とくに卵胞発育、卵の受精および胚発育の過程において、テロメラーゼ活性がどのように関与するかについては、ほとんど研究されていない。今回、テロメラーゼ活性と卵、および胚の発育過程との関連について検討した。まず卵を取り囲む卵丘顆粒膜細胞、及び卵胞壁を内側から囲む壁側顆粒膜細胞に着目し、体外受精の採卵時に個々の卵胞ごと個別採卵を行い、採取されたヒト卵丘顆粒膜細胞及び壁側顆粒膜細胞のテロメラーゼ活性の存在の有無と、もし存在するとすればその部位による発現の差が存在するかについて、TRAP(stretch PCR)法を用いて測定した。今回の検討ではヒト卵丘顆粒膜細胞及び壁側顆粒膜細胞には、常にテロメラーゼ活性が存在する事が明らとなったが、顆粒膜細胞の部位による活性の差は認められなかった。卵及び胚におけるテロメラーゼ活性の測定は、倫理的にヒトの卵・胚を用いる事が不可能なため、マウス卵を用いて行った。PMSG及びHCGにて過排卵処理を行ったマウスを用い、matingしなかったマウスより未受精卵を、matingしたマウスより受精卵を各stageで回収した。その結果テロメラーゼ活性は未受精卵で活性が高く、受精卵はstageが進むにつれて活性が低下した。しかし胞胚期になると活性が上昇した。今回の研究では、発育した卵胞の卵・顆粒膜細胞の両者にテロメラーゼ活性が存在し、かつテロメラーゼ活性は卵の受精・胚発育の過程で変動する事が明かとなった。
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[Publications] K.Nakahara et al.: "The incidence of apoptotic bodies in membrana granulosa can predict prognosis of ova from patients participating in in vitro fertilization programs." Fertility and Sterility. 68. 312-317 (1997)
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[Publications] K.Nakahara et al.: "Ovarian fecundity in patients with endometoriosis can estimated by the incidence of apoptotic bodies." Fertility and Sterility. 69. 931-935 (1998)
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[Publications] N.Ohta et al.: "Expression on CD44 in human cumulus and mural granulosa cells of individual patients in in-vitro fertilization programmes." Molecular Human Reproduction. 5. 22-28 (1999)
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[Publications] P.Moreira et al.: "Are there any relationship between the fecundity of bilateral ovaries in an individual patient and the incidence of apoptotic granulosa cells?" Human Reproduction. 14. 161-156 (1999)
