卵巣癌化の分子機構に関する研究、癌抑制遺伝子のクローニング

1998 Fiscal Year Final Research Report Summary

• Project/Area Number: 09671664
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Section: 一般
• Research Field: Obstetrics and gynecology
• Research Institution: Gunma University
• Principal Investigator: 鹿沼 達哉 群馬大学, 医学部, 教授 (90241885)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 和気 徳夫 九州大学, 生体防御医学研究所, 教授 (50158606)
• Project Period (FY): 1997 – 1998
• Keywords: 卵巣癌 / TGF β / Smad / 子宮内幕癌 / hMTH1 / p16^<INK4A> / Differential Display法

Research Abstract

1)p16-cyclinD/cdk4-Rb系の遺伝子変異と卵巣癌化の分子機構との関わりを、ヒ卜卵巣癌細胞株を用いて行った。癌抑制遺伝子と考えられているp16あるいはRbの高頻度の機能喪失が卵巣癌株において観察されて癌遺伝子と考えられているcyclinDの過剰発現が観察された。卵巣癌の約90%においてp16・cyclinD/cdk4・Rb系の一つの遺伝子に機能異常が存在することが示された。
2)ヒト卵巣癌組織のSmad3遺伝子の変異を解析した。Exon2で7例(29%)にLOHが観察され、2例にバンドシフトが観察された。Exon5では1例にバンドシフトが観祭された。ヒト卵巣癌の41,7%(10/24例)でSmad3に異常が存在することが示唆された。
3)ヒト卵巣癌組織を用いて、TGF・β R I, TGF・β R II, Smad2, Smad4の変異の有無を解析した。TGF・β R I 遺伝子Exon5内で10例(31.3%)にframeshift mutationが観察された。Frameshift mutationが観察された症例ではTGF・β R I蛋白の発現がみられなかった。
4)hMTH1遺伝子について卵巣癌組織49例、ヒト卵巣癌組織株9例を用いて解析した。卵巣癌組織49例中1例と卵巣癌培養細胞株9例中1例(3.4%)で、NsiI多型が認められた。癌組織12例、細胞株2例(24.1%)において、codon119にサイレント変異が認められた。
5)子宮内膜癌組織でのER-βの発現様式と、癌の準展や悪性度との関連について検討した。子宮内膜癌組織36例の臨床進行期、細胞分化度、筋層浸潤の深さとER・β/ER・αの発現比を比較した。多変量解析の結果、ER・β/ER・α ratioと筋層浸潤の深さとの間には有意な相間があり、筋層浸潤の程度が深いものほどER・βがER・αに比べ相対的に強く発現していた。
6)エストロゲンによって子宮内膜癌に誘導される遺伝子を同定し、癌化との関わりを解析することを目的としてDifferential Displayを行った。遺伝子fragment(Probe1)と遺伝子fragment(Probe2)を単離した。Probe1はDouble strand DNA break-repair geneと、Probe2はmouse E46 LIKE geneと、それぞれ99%、98%のホモロジーを有していた。DSBR遺伝子は、遺伝子修復機構の他に,Eによる細胞増殖に関与する遺伝子であり、マウスの脳に発現していること以外その機学が未知であつたE46遺伝子には、Eによる細胞増殖を抑制する働きがある可能性が示唆された。

Research Products

• [Publications] Tatsuya Kanuma: "Role of the Rb-mediated cell cycle regulatory pathway in humanovarian cancer cell lines"Annales of Cancer research and Therapy. 6(1). 51-57 (1997)
• [Publications] Dang Wang, Tatsuya Kanuma et al.: "Mutation analysis of the Smad3 gene in human ovarian cancers"International Journal of Oncology. 15(5). 949-953 (1999)
• [Publications] Wang Dang, Tatsuya Kanuma et al.: "Analysis of nene alteration in TGF-β signal transdution pathway in human ovarian cancer"Cancer Research. (Under contribution).
• [Publications] Fumiko Takama, Tatsuya Kanuma et al.: "Alterations of the hMTH1 gene may not be specifically associated with sporadic human ovarian cancer"International Journal of Oncology. (Under contribution).
• [Publications] Fumiko Takama, Tatsuya Kanuma et al.: "Estrogen Receptor β expression and depth of myometrial invasion in human ondometrial cancer"Clinical Cancer Research. (Under contribution).
• [Publications] Fumiko Takama, Tatsuya Kanuma et al.: "Analysis with differential display method about estrogen inducible genes in the growth accelerated cell lines of human ondometrial cancer"Cell Growth & Differentiation. (Under contribution).