1997 Fiscal Year Annual Research Report
ヒトケラチノサイトの分化に特異的なHPV-16遺伝子転写制御領域の同定
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09671769
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Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Research Institution | St. Marianna University School of Medicine |
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Principal Investigator |
堤康 一朗 聖マリアンナ医科大学, 医学部, 講師 (40217344)
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| Keywords | HPV-16 / ヒトケラチノサイト / 分化 / 転写制御 |
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| Research Abstract |
Human papillomavirus 16(HPV-16)型の遺伝子調節領域(Long control region:LCR)の5'側から種々の制限酵素で削ったDNA断片-CAT遺伝子プラスミドを数種類作製した。また、HPV-16型LCR上に変異を作製したDNA断片-CAT遺伝子プラスミドの提供を受けて現在確認している。ヒトケラチノサイトをヌードマウス皮下で重層化(分化)させる実験系は安定し、この系を使ってトランスフォームさせた上皮細胞の分化能力(あるいは分化異常)の相違を検出できる事が確認された(他施設との共同研究として発表;研究発表参照)。本研究の目的はHPV-16型LCR上にあるヒトケラチノサイトの分化に特異的な転写制御領域を同定する事であるが、現在、野生型のHPV16型LCR-CATプラスミドをneo耐性遺伝子と共にHPV16型不死化ヒトケラチノサイトに導入しG418で選択した細胞をヌードマウス皮下に移植し分化させ回収しCAT染色を行ったがCAT活性が検出できず(再構築上皮の分化匂配に伴ないCAT染色が異なる事を予想していた)困っている。一方、ヌードマウス皮下以外のヒトケラチノサイト分化の実験系としてのカルシウム誘導を使用したSuspension cultureの系が機能し、ヒトケラチノサイトのアポトーシス及び最終分化に関しての若干の知見を得た(他施設との共同研究として発表;研究発表参照)。
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[Publications] Kikuchi K,Tsutsumi K,Ohta Y,Yasumoto S.: "Time correlation of commitment to calcium-induced apotosis and terminal defferentiation in human ectocervical keratinocytes in suspension cultures." Cell Growth & Differentiation. 8. 571-579 (1997)
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[Publications] Ohta Y,Tsutsumi K,Kikuchi K,Yasumoto S.: "Two distinct human uterine cervical epithelial cell lines that were eatablishment after transfecting human papillomavirus 16 DNA." Jpn.J.Cancer Res.88. 644-651 (1997)
