リボソームタンパクS20を選択マーカーとした口腔内グラム陽性菌のベクター系の開発

1999 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 09671873
• Research Institution: Nihon University School of Dentistry at Matsudo
• Principal Investigator: 城座 映明 日本大学, 松戸歯学部, 講師 (50271333)
• Keywords: Streptococcus gordonii / リボソームタンパクS20 / scFv / Bacillus brevis / 分泌生産

Research Abstract

引き続きStreptococcus gordoniiのリボソームタンパクS20遺伝子のクローン化をPCR技術を用いて試みた。大腸菌、枯草菌等のリボソームタンパクS20のアミノ酸配列を参考としたプライマーを用いたPCRでは、良好な結果は得られなかった。非公式ながらオクラホマ大学から公開されているStreptococcus pyogenesのリボソームタンパクS20をコードする遺伝子を基としてPCRを検討した。しかしながら、目的の遺伝子を検出してクローン化することはできなかった。
口腔内疾患の予防法の一つとして受動免疫は有効な手段である。申請者の所属する研究室ではPorphyromonas gingivalisに起因する赤血球凝集能を抑制するモノクローナル抗体、および当該クローンより派生したsingle chain variable fraction(scFv)抗体を大腸菌を宿主として産生することに成功している。この人工抗体をコードする遺伝子をS.gordoniiを宿主とした有用タンパク質の口腔内分泌系にて発現するべく、多数のプラスミドを構築した。また、本タンパク質をグラム陽性細菌であるBacillus brevisにより分泌生産することに成功した。

Research Products

• [Publications] Y.Shibata,M.Hagakawa,H.Tokoguchi,T.Shiroza,Y.Abiko: "Determination and Chracteri Lation of the Hewagglutowi associated Short Moffs Found in P.gingivalis geueproducts"Journal of Biological Chemistry. 274・8. 5012-5020 (1999)