軟骨肉腫由来軟骨成長因子エコジェニン/CTGFのレセプターの分子クローニング

1998 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 09671893
• Research Institution: Okayama University
• Principal Investigator: 中西 徹 岡山大学, 歯学部, 助教授 (30243463)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 大山 和美 岡山大学, 歯学部, 教務員 (00253021) ; 服部 高子 岡山大学, 歯学部, 助手 (00228488) ; 滝川 正春 岡山大学, 歯学部, 教授 (20112063)
• Keywords: 内軟骨性骨化 / CTGF / クロスリンク / ペプチドマッピング / 軟骨細胞 / プロテオグリカン

Research Abstract

(1) 軟骨肉腫由来軟骨細胞株HCS-2/8より単離されたCTGF特異的レセプターと思われる260-280kDaの分子は、CTGF刺激により特異的にリン酸化を受けた。
(2) CTGFとクロスリンクしたレセプターについてマススペクトルを用い分子量に基づくペプチドマッピングを行ったところ、レセプター分子としての可能性をもつ数種の蛋白質を見い出した。
(3) CTGF結合アフィニティークロマトグラフィーによってレセプター分子を含むCTGF結合蛋白質を精製した。
(4) ウサギ初代成長軟骨細胞において細胞の分化とともに、CTGF産生量は増加するが、逆にCTGFのレセプターへの結合は減少した。さらに、肋骨を切片にしてCTGFとの結合を調べた場合も、CTGFの結合は静止軟骨、成長軟骨で高く、骨へ近づくにつれて減少した。
(5) HCS細胞をヘパリナーゼ処理するとCTGFの結合が減少することから、低親和性レセプターはプロテオグリカンの一部であることが示唆された。

Research Products

• [Publications] Shimo, T.: "Inhibition of endogenous expression of connective tissue growth factor by its antisense oligonucleotide and antisense RNA suppresses proliferation and migration of vascular endothelial cells." J. Biochem.124. 130-140 (1998)
• [Publications] Nishida, T.: "Demonstration of receptors specific for connective tissue growth factor on a human chondrocytic cell line (HCS-2/8)" Biochem. Biophys. Res. Commun.247. 905-909 (1998)
• [Publications] Tamatani, T.: "Establishment of the enzymelinked immunosorbent assay for connective tissue growth factor (CTGF) and its detection in the sera of biliary atresia." Biochem. Biophys. Res. Commun.251. 748-752 (1998)
• [Publications] Ohnishi, H.: "Increased expression of connective tissue growth factor in the infarct zone of experimentally induced myocardial infarction in rats." J. Mol. Cell Cardiol.30. 2411-2422 (1998)
• [Publications] 中西徹: "結合組織成長因子CTGF/Hcs24の生理機能。" 生化学. 印刷中.