1998 Fiscal Year Annual Research Report
耳下腺腺房細胞における受容体刺激に伴う細胞内イオン動態の画像解析
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09671903
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| Research Institution | Health Sciences University of Hokkaido, School of Dentistry |
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Principal Investigator |
東城 庸介 北海道医療大学, 歯学部, 助教授 (90111731)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
根津 顕弘 北海道医療大学, 歯学部, 助手 (00305913)
谷村 明彦 北海道医療大学, 歯学部, 講師 (70217149)
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| Keywords | 耳下腺細胞 / 細胞内カルシウムイオン / Ca^<2+>ウェーブ / イノシトール1,4,5-三リン酸 / イソプロテレノール / β受容体 / イメージング |
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| Research Abstract |
1. 膜透過性細胞を膜結合性Ca^<2+>蛍光色素(Calcium Green C_<18>)でラベルし、Caged IP_3の光分解によって惹起されるストアからのCa^<2+>放出パターンを画像解析装置を用いて観察した。低濃度のIP_3(〜0.2μM)の解離は腺腔膜の近傍から細胞全体に広がるCa^<2+>ウエーブ様の反応を起こした。このcaged IP_3による反応はタプシガージンでCa^<2+>ポンプを抑制した細胞でも観察された。一方、高濃度のIP3(〜4μM)の解離は細胞全体で同時にCa^<2+>放出反応を起こした。以上の結果から、腺腔膜近傍のCa^<2+>ストアは基底側よりもIP3に対する感受性が高いことが示唆された。
2. 耳下腺腺房細胞のCa^<2+>分布に対するイソプロテレノール(ISO)の効果を調べた。アミラーゼの最大分泌を刺激する0.1-10μM ISOは細胞内Ca^<2+>の分布に全く影響を与えなかった。高濃度(100μM)のISOは有意な[Ca^<2+>]iの上昇を引き起こした。この反応はβ遮断薬であるブロプラノロールでは全く影響を受けず、α遮断薬であるフェントラミンによって強く抑制された。この結果から、β受容体の活性化は腺房細胞のCa^<2+>動員を刺激しないことが示唆された。
3. 耳下腺腺房細胞にCl^-蛍光指示薬SPQを取り込ませ、受容体刺激による細胞内Cl^-の分布変化をモニターした。Ca^<2+>動員性アゴニストであるカルバコールやサブスタンスPは細胞内Cl^-濃度の速やかな低下、すなわち細胞外へのCl^-の放出を起こした。しかし、Cl^-分布の変化は細胞全体で同時に惹起され、ウエーブ様の反応は認められなかった。SPQの蛍光変化はβ受容体刺激によってもしばしば惹起され、Cl^-分布の変化とCa^<2+>動員との関係についてはさらなる検討が必要である。
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[Publications] Yosuke Tojyo: "Digital imaging of intracellular Ca^<2+> signaling in rat parotid acinar cells" Life Sciences. 62・17/18. 1635-1639 (1998)
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[Publications] Akihiko Tanimura: "Polarized Ca^<2+> release in saponin-permeabilized parotid acinar cells evoked by flush photolysis of ‘caged' inositol 1,4,5-trisphosphate" Biochem.J.332(3). 769-772 (1998)
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[Publications] Akihiko Tanimura: "Analysis of sputiul and temporal characteristics of Ca^<2+> release in permeabilized parotid cells" Eur.J.Morpho.36. 157-160 (1998)
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[Publications] Yosuke Tojyo: "Activation of β-adrenoceptors does not cause any change in cytosolic Ca^<2+> distribution in rat parotid acinar cells" Eur.J.Pharmacol.360(1). 73-79 (1998)
