1997 Fiscal Year Annual Research Report
新しく見い出されたグリコサミノグリカンの生理活性と標的タンパク質との相互作用
Project/Area Number |
09672185
|
Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
|
Research Institution | Chiba University |
Principal Investigator |
戸井田 敏彦 千葉大学, 薬学部, 助教授 (60163945)
|
Keywords | グリコサミノグリカン / 線維芽細胞増殖因子 / ヘパラン硫酸 / ヘパリン / 相互作用 / 核磁気共鳴法 |
Research Abstract |
今回採択された研究の目的は,新たに軟体動物アフリカマイマイの体壁に見出されたグリコサミノグリカンの生理活性を探索することである.本年度は主に研究の対象となる糖鎖,タンパク質の精製,同定を目的とする.具体的には以下の手順によって研究を遂行している.1.アフィニティーカラムの作成 アフリカマイマイよりグリコサミノグリカンを大量に単離精製する.それを化学的に脱アセチル化した糖鎖,さらに再硫酸化した糖鎖を調製する.核磁気共鳴装置を用いて,修飾した各糖鎖の構造を確認する.これらを用いてヘパリンセファロースカラムの調整法に準じてアフィニティーカラムを作成し,ヒト血清,ウシ血清を用いてこれらのカラムに親和性を有するタンパク質,ペプチドを分画する(発表準備中).2.分画したタンパク質のアミノ酸配列をアミノ酸シークエンサーによって調べ,その一次構造からタンパク質・ペプチドの同定を行い,溶液中におけるコンホメーション解析をNMR装置を用いて行う(発表準備中).3.アフリカマイマイから単離したグリコサミノグリカン,化学修飾したグリコサミノグリカンを酵素的及び亜硝酸分解法によって部分分解し,カラムクロマトグラフィーによって二糖から十四等のオリゴ糖に分画する(Glycobiology,印刷中). 以上の研究に関連して,本年度9報の学術論文,2報の総説を発表した.
|
Research Products
(8 results)
-
[Publications] 戸井田敏彦 他6名: "Chemical microdetermination of heparin in plasma." Analytical Biochemistry. 251. 219-226 (1997)
-
[Publications] 戸井田敏彦 他6名: "Glycosaminoglycans ca influence fibroblast growth factor-2 mitogenicity without significant growth factor binding" Biochemical and Biophysical Research Communication. 235. 369-373 (1997)
-
[Publications] 戸井田敏彦 他6名: "Detection of glycosaminoglycans as a copper(II) complex in high performance liguid chromatography" Journal of Chromatography. 787. 266-270 (1997)
-
[Publications] 戸井田敏彦 他2名: "Structural diversity of dermatan sulfate in porcine dermis" Biological Pharmaceutical Bulletin. 20(7). 721-726 (1997)
-
[Publications] 戸井田敏彦 他7名: "Structural differences and the presence of unsubstituted amino groups in heparan sulphates from different tissues and species" Biochemical Journal. 322. 499-506 (1997)
-
[Publications] 戸井田敏彦 他3名: "Preparation and structure of heparin lyase-derived heparan sulfate oligosaccharides" Glycobiology. 7(2). 231-239 (1997)
-
[Publications] 戸井田敏彦 他1名: "Heparin Oligosacchaides:New analogues development and applications" Marcel Dekker, Inc. New York, 65 (1997)
-
[Publications] 戸井田敏彦 他3名: "BioMethods, Vol.9 Analysis of the structure of heparin and heparan sulfate" Birkhause, Verlag Basel, 15 (1997)