1998 Fiscal Year Annual Research Report
レーザー蛍光検出キャピラリ電気泳動法による官能基特異的分析法の開発
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09672193
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| Research Institution | University of Shizuoka |
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Principal Investigator |
豊岡 利正 静岡県立大学, 薬学部, 教授 (40183496)
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| Keywords | キャピラリ電気泳動 / レーザー蛍光検出 / 官能基分析 / アルゴンレーザー / ヘリウム-カドミウムレーザー / アミノ酸 / ペプチド / チオール |
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| Research Abstract |
キャピラリ電気泳動法用の各種レーザー蛍光検出器に着目し、アルゴンイオンレーザー、ヘリウム-カドミウムレーザー、ダイオードレーザー蛍光検出に適した各種官能基(カルボキシル基、カルボニル基、アミノ基、チオール基、水酸基など)に選択的でかつ適切な波長を励起波長とする標識試薬を検索し生理活性物質の超微量分析を検討する。
今年度は前年度に引き続きアルゴンイオンレーザーおよびヘリウム-カドミウムレーザー蛍光検出器それぞれに適した母核を捜すことを中心に検討した。その結果、アルゴンイオンレーザー(488nm)には、ニトロベンゾフラザン骨格を有する各種の試薬(NBD-PyNCS,NBD-APy,NBD-Pro-COCl等)が波長特性、感度の面で優れていた。ヘリウム-カドミウムレーザーでは、調べた幾つかの蛍光性の化合物の中で4-(N,N-dimethylaminosulfonyl)-7-substituted-2,1,3-benzoxadiazole(DBD)の骨格が最適と判断した。DBDのアミン誘導体には、長波長側(442nm)で感度よく測定できた。一方チオール誘導体では、短波長側(325nm)がアミン誘導体に比較して感度は悪いものの十分測定可能であった。そこで、DBD-PyNCSを用いたDL-アミノ酸やペプチドのキャピラリ電気泳動-アルゴンイオンレーザー(488nm)蛍光検出法による分離検出を検討し、DL-アミノ酸の異性体やペプチドを高感度で良好に分離検出できた。現在細胞内のチオール化合物ののキャピラリ電気泳動-ヘリウム-カドミウムレーザー(325nm)蛍光検出法による分離検出をおこなっている。
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[Publications] Yi-Ming Liu,et al.: "Separation of Amino Acid and Peptide Stereoisomers by Nonionic Micelle-・・・・" Journal of Chromatography A. 800. 345-354 (1998)
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[Publications] Dongri Jin,et al.: "Indirect Resolution of Thiol Enantiomers by High-performance Liquid・・・・・・・" Analyst. 123. 1271-1277 (1998)
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[Publications] Dongri Jin,et al.: "Total Resolution of 17 DL-Amino Acids Labelled with a Fluorescent Chiral・・・・" Journal of Chromatography A. 822. 215-224 (1998)
