1997 Fiscal Year Annual Research Report
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09672344
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Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Research Institution | Tokyo Metropolitan Organization for Medical Research |
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Principal Investigator |
加瀬 良一 (財)東京都臨床医学総合研究所, 臨床遺伝学研究部門, 研究員 (20150203)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
内海 甲一 (財)東京都臨床医学総合研究所, 臨床遺伝学研究部門, 研究員 (60291150)
桜庭 均 (財)東京都臨床医学総合研究所, 臨床遺伝学研究部門, 研究員 (60114493)
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| Keywords | ファブリー病 / リソソーム / α-ガラクトシダーゼ |
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| Research Abstract |
Fabry病は、リソソーム酵素α-ガラクトシダーゼの遺伝的活性欠損による生体内基質(スフィンゴ糖脂質・グロボトリアオシルセラミドまたはセラミドトリヘキソシド)の蓄積症である。心筋型ともいえる・亜型Fabry病で発見されたミスセンス変異α-ガラクトシダーゼは、細胞内で過剰に分解されることにより、低いα-ガラクトシダーゼ活性を示すと考えられる。この点に注目し、α-ガラクトシダーゼ分解に対する保護作用を示す、基質アナログの検索をおこなった。in vitroスクリーニング系の作製には、バキュロウイルス・昆虫細胞系により発現・精製した、正常および亜型変異(Q279EおよびR301Q)α-ガラクトシダーゼ標品を用いた。スクリーニングで指標とする作用は、基質アナログによる酵素活性阻害、および患者由来の細胞中でのα-ガラクトシダーゼ活性上昇とした。基質アナログとしてα-ガラクトース誘導体(メチルα-D-ガラクトピラノシドおよびガラクツロン酸)、アノマーであるβ-ガラクトース誘導体(メチルβ-D-ガラクトピラノシド)、およびβ-キシロースの還元末端に疎水性の高い部分を有する(フェニルβ-D-チオキシロシド、n-ヘキシルβ-D-チオキシロシド、メチルβ-D-チオキシロシド)を選び、検討をおこなったが、これらの糖誘導体については、十分な効果は認められなかった。さらに、糖鎖レプリカ・ペプチド等、物性の異なる基質アナログの効果も検討する予定でいる。
基質アナログ全身投与のモデルとして、正常および亜型変異(R301Q)α-ガラクトシダーゼcDNAを導入したトランスジェニック・マウスの作製を試み、それらの系統を確立した。
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Research Products
(3 results)
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[Publications] Shimmoto Michie: "Generation and Characterization of Transgenic Mice Expressing a Human α-Galactosidase with an R301Q Substitution Causing a Variant Form of Fabry Disease" FEBS Letters. 417・1. 89-91 (1997)
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[Publications] Toshika Okumiya: "Novel Missonse Mutation (M72V) of α-Galactosidase Gene and Its Expression Product in an Atypical Fabry Hemizygote" Human Mutations. Suppl・1. S213-S216 (1998)
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[Publications] Ryoichi Kase: "Immunohistochemical Characterization of Transgenic Mice Highly Expressing Human Lysosomal α-Galactosidase" Biochimica et Biophysica Acta. (発表予定).
