1997 Fiscal Year Annual Research Report

CaCo-2cellにおけるアポA-IVの合成・分泌機序について

Research Project

Project/Area Number	09672353
Research Category	Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
Research Institution	Gifu University
Principal Investigator	清島満岐阜大学, 医学部, 教授 (10171315)
Keywords	アポA-IV / 脂肪酸 / CaCo-2cell
Research Abstract	アポA-IVはヒト小腸粘膜細胞において特異的に合成・分泌されるユニークなアポ蛋白である。申請者はこれまで主としてラットを用いてこのアポ蛋白の合成機序を明らかにしてきたが、今回さらにアポA-IVの生理的機能を明らかにする目的でヒト大腸ガン由来のCaCo-2 cell(ヒト小腸粘膜細胞の機能を保持)を用いて、脂肪酸の種類によるアポA-IV合成に与える影響について検討した。 CaCo-2 cellの細胞極性を保持した条件で実験するため、mambrane chamber付きのTranswell(Costar)を用いて検討した。細胞がconfluentになってからserum-free DMEMおよび2種類の脂肪酸を加えて比較した。0.6mMの中鎖脂肪酸であるCaprylic acid (C_<8:0>)と長鎖脂肪酸のOleic acid(C_<18:1>)を12mM Na taurocholate、2mM phosphatidyl cholineとともにculture wellに加えた。incubation timeは6および24時間とし、まずlower wellに分泌されるリポ蛋白について検討した。TGはC_<18:1>の24時間においてのみ有意に増加(2倍)していたが、アポA-IVmRNAレベルに変化は認められなかった。そこで脂肪酸の濃度を0.6mMから6.0mMに増加させて検討したところ、C_<18:1>の6および24時間においてC_<8:0>に比べ16〜20倍のTGの増加が認められた。しかしこの脂肪酸濃度においては細胞障害が著しく、mRNAを検討するに十分なRNAを得ることができなかった。そこで現在脂肪酸の至適濃度を決定するため種々の濃度で検討を行い、同時にmedium中と細胞内におけるアポA-IVの蛋白濃度も測定中である。この結果をふまえ、さらにアポB-48も測定してアポA-IVとの機能的差異を明らかにする予定である。

Research Products
(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] K.Saito, et al.: "Marked increases in concentrations of apolipoprotein in the cerebrospinal fluid of poliovirus-infected macaques:relationships between apolipoprotein concentrations and severity of brain injury." Biochem.J.321・1. 145-149 (1997)
[Publications] K.Nishigaki, et al.: "Plasma Fas ligand,an inducer of apoptosis and plasma soluble Fas,an inhibitor of apoptosis in patients with chronic congestive heart failure." J.Am.Coll.Cardiol.29・5. 1214-1220 (1997)
[Publications] S.Minatoguchi, et al.: "Effeccts of adrenaline infusion on plasma lipids and noradrenaline levels in rabbits with adriamycin-induced cardiomyopathy." Clin.Exp.Pharm.Physiol.24・7. 477-480 (1997)
[Publications] H.Song, et al.: "Cerebrospinal fluid apo E and apo A-I concentrations in early-and late-onset Alzheimer's disease." Neuroscience Lett.231・8. 175-178 (1997)
[Publications] H.Song, et al.: "IL-β and TNF-α suppress apolipoprotein(apo) E secretion and apo A-I expression in Hep G2 cells." Cytokine. (In press).
[Publications] H.Song, et al.: "Apo A-I and apo E cncentrations in cerebrospinal fluid of patients with acute meningitis." Ann.Clin.Biochem.(In press).

1997 Fiscal Year Annual Research Report

CaCo-2cellにおけるアポA-IVの合成・分泌機序について

Principal Investigator

清島 満 岐阜大学, 医学部, 教授 (10171315)

Research Products

[Publications] K.Saito, et al.: "Marked increases in concentrations of apolipoprotein in the cerebrospinal fluid of poliovirus-infected macaques:relationships between apolipoprotein concentrations and severity of brain injury." Biochem.J.321・1. 145-149 (1997)

[Publications] K.Nishigaki, et al.: "Plasma Fas ligand,an inducer of apoptosis and plasma soluble Fas,an inhibitor of apoptosis in patients with chronic congestive heart failure." J.Am.Coll.Cardiol.29・5. 1214-1220 (1997)

[Publications] S.Minatoguchi, et al.: "Effeccts of adrenaline infusion on plasma lipids and noradrenaline levels in rabbits with adriamycin-induced cardiomyopathy." Clin.Exp.Pharm.Physiol.24・7. 477-480 (1997)

[Publications] H.Song, et al.: "Cerebrospinal fluid apo E and apo A-I concentrations in early-and late-onset Alzheimer's disease." Neuroscience Lett.231・8. 175-178 (1997)

[Publications] H.Song, et al.: "IL-β and TNF-α suppress apolipoprotein(apo) E secretion and apo A-I expression in Hep G2 cells." Cytokine. (In press).

[Publications] H.Song, et al.: "Apo A-I and apo E cncentrations in cerebrospinal fluid of patients with acute meningitis." Ann.Clin.Biochem.(In press).

清島満岐阜大学, 医学部, 教授 (10171315)