ヒト細胞の紫外線誘導突然変異を制御するサイトカインとプロテアーゼに関する研究

1997 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 09680516
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• Research Institution: Chiba University
• Principal Investigator: 鈴木 信夫 千葉大学, 医学部, 教授 (90111426)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 日和佐 隆樹 千葉大学, 医学部, 助手 (30260251) ; 石嶌 純男 千葉大学, 医学部, 助手 (70184520)
• Keywords: ヒト細胞 / 紫外線 / 突然変異 / サイトカイン / プロテアーゼ

Research Abstract

波長254nm付近の紫外線でヒト細胞を照射すると、DNAの傷害とその修復反応、遺伝子あるいはそれに引き続く形質レベルでの突然変異の発生(変異誘導)、あるいは細胞分裂の停止など生死にかかわる様々な反応が起こる。本研究の目的は、紫外線応答の中でも特に突然変異の誘導に的を絞り、サイトカイン・プロテアーゼの変異誘導制御系路の骨格を明らかにすることである。
すでに樹立してある紫外線誘発プロテアーゼの活性レベルが高い派生株から高活性レベルの細胞溶解サンプルを得て、目的酵素を抽出した。粗酵素標品中のプロテアーゼ活性は、アンチパインアフィニティクロマトグラフィー法により、アンチパイン親和性大であることが確認された。変異誘導促進との関連については、K-ras codon 12塩基置換変異検出法であるPCRとDifferential dot-blot hybridization併用法で変異を測定すると、その促進活性と連動するプロテアーゼの活性変動があるとの示唆を得た。次に超高頻度の変異誘導が可能な細胞株と変異誘導が全くみられない派生株など、これまでに樹立した細胞類とインターフェロン処理の有無などの細胞処理条件を種々比較することにより、Differential Display法を用い、発現が誘導あるいは抑止される遺伝子を検出した。XPGおよびNucleophosmin遺伝子の関与が示唆された。

Research Products

• [Publications] Suzuki,N: "UV-induced mutations affecting codon12 of the K-ras gene are suppressed by interferon-α in human Rsa cells" Mutation Res.373. 251-256 (1997)
• [Publications] Fujii,K: "Abnormal DNA synthesis activity induced by X-rays in nevoid basal cell carcinoma syndrome cells" Biochem.Biophys.Res.Commun.240・2. 269-272 (1997)
• [Publications] Miura,N: "Establishment of a new human megakaryoblastic cell line,CMY,with chromosome 17p abnormalities" Int.J.Mol.Med.(印刷中)
• [Publications] 鈴木信夫: "ストレスがもたらす万病のもとを求めて--新しく見出したSF-EPA・SF-Xネットワークから予測される生体機能" 千葉医学. 73. 61-65 (1997)
• [Publications] 鈴木信夫: "ストレス感受性突然変異促進因子" BIO INDUSTRY. 14・4. 5-9 (1997)