1997 Fiscal Year Annual Research Report
アポトーシス関連システイン・プロテアーゼICH-1のがん抑制活性に関する研究
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09680711
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Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Research Institution | Chiba University |
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Principal Investigator |
日和佐 隆樹 千葉大学, 医学部, 助手 (30260251)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
中川原 章 千葉県がんセンター研究所, 生化学研究部, 部長 (50117181)
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| Keywords | アポトーシス / カスパーゼ / Ras / がん抑制活性 |
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| Research Abstract |
カスパーゼ・ファミリーのプロテアーゼはアポトーシスの誘導過程において必須の役割を果たすと想定されているが、それらのアポトーシス以外の生物活性はよくわかっていない。そこでカスパーゼ-1(ICE)、-2(ICH-1)、-3(CPP32)cDNAをHa-ras-トランスフォームNIH3T3細胞に導入し発現を誘導してその影響を調べた。その結果、これらのプロテアーゼを高発現してもそれのみではアポトーシス様の変化は観察されなかった。しかしながら、カスパーゼ-2を高発現したクローンは形態的に変化し、しばしば正常復帰していた。このような形態変化はカスパーゼ-2の発現量と相関していた。また、正常復帰したクローンは軟寒天中での基質非依存性増殖能を失っていた。これらのことからカスパーゼ-2はHa-ras-トランスフォーム細胞を正常復帰させるがん抑制活性を保持すると推定された。さらに他のトランスフォーム細胞について調べたところ、v-src-トランスフォーム細胞についても同様の効果を示したが、Ki-ras-トランスフォーム細胞には影響を及ぼさなかった。Ha-RasとKi-Rasは類似した作用機序で働くと推定されているので、上記の結果からカスパーゼ-2はHa-Rasに特異的に作用する可能性が示唆される。そこでHa-Ras蛋白質をウエスタン法で調べたところ、カスパーゼ-2の高発現株ではHa-Rasが減少していることが判明した。Ha-ras-トランスフォーム細胞の抽出液をin vitroで加温するとHa-Ras蛋白質が分解され減少するが、この時、カスパーゼ・インヒビターを加えておくとその分解が完全に抑制された。これらのことから、カスパーゼ-2はHa-Ras蛋白質の分解を亢進してトランスフォーム細胞を正常復帰させるものと推定された。
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[Publications] Hiwasa,T.: "Enhancement of chemosensitivity toward anticancer drugs by high expression of caspase-1 in NIH3T3 cells." Anticancer Drug.9. 82-87 (1998)
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[Publications] Hiwasa,T.: "GDNF-induced neurite formation was stimulated by protein kinase inhibitors and suppressed by Ras inhibitors." Neurosci.Lett.238. 115-118 (1997)
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[Publications] Nakagawara,A.: "High levels of expression and nuclear localization of interleukin-1β converting enzyme(ICE)and CPP32 in favorable human neuroblastomas." Cancer Res.57. 4578-4584 (1997)
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[Publications] Ohkoshi,M.: "Growth-suppressive activities of serine protease inhibitors,FOY-305,ONO-3403 and FO-349 toward human carcinoma cells." Oncol.Rep.4. 521-523 (1997)
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[Publications] Hiwasa,T.: "Potent growth-suppressive activity of a serine protease inhibitor,ONO-3403,toward malignant human neuroblastoma cell lines." Cancer Lett.(印刷中). (1998)
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[Publications] Hiwasa,T.: "Biological effects of Ras and cystatin α in mouse fibroblasts." Proteolysis in cell functions.V.K.Hopsu-Havu,M.Jarvinen and H.Kirschke(eds.),IOS Press,Amsterdam. 500-506 (1997)
