1998 Fiscal Year Annual Research Report

2軸レーザ照明蛍光生体顕微鏡法による巨大分子の毛細血管壁透過機序の解明

Research Project

Project/Area Number	09680846
Research Institution	THE UNIVERSITY OF TOKYO
Principal Investigator	柴田政廣東京大学, 大学院・医学系研究科, 講師 (60158954)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	神谷瞭東京大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (50014072)
Keywords	生体顕微鏡 / 蛍光物質 / レーザー / 微小循環 / 物質透過性
Research Abstract	2軸レーザー照明を利用した広視野、長作動距離型の蛍光生体顕微鏡を考案し、毛細血管壁を介する物質透過過程の分析を行った。光源には使用蛍光物質であるFITC-dextranの最大吸収波長を発振波長に持つアルゴンレーザーを用い、2光路に分割後、オプティカルファイバにより顕微鏡まで誘導した。対物レンズの横2方向から組織に対し約60度の角度で交差・照射することにより、直径6mmの領域内に存在する蛍光物質FITC-dextranを均一強度で励起可能となった。得られた画像は干渉フィルタにより蛍光の有効成分のみを選択し、SITTVカメラにより映像化する。この方法を用いることで、広視野のもとでの微小循環動態および血管壁からの物質透過の様子が鮮明に観察でき、また視野内の全ての領域においてバックグラウンドのsubtractionなしで蛍光強度の定量化が可能になった。試作顕微鏡によりhamster cheek pouchの微小循環および物質透過過程の観察を行った。通常の白色光による透過照明では毛細血管レベルまでの可視化が困難な広視野、弱拡観察においても新しく開発したレーザー照明では鮮明な画像として得られた。またヒスタミンの局所投与による透過過程の観察により、毛細血管直後の後細静脈周辺での透過性亢進が明らかになった。またモンタージュ法などの必要なしに広視野での観察ができるため、leakage siteの大きさや存在位置が容易に確認でき、透過過程の分析に有用であることが確認できた。

Research Products
(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] M.Shibata,S.Ichioka,A.Kamiya: "Dual-beam laser illuminator of fluorescence microscope for in vivo microcirculation studies." Med.& Biol.Eng.& Comput.37(in press). (1999)
[Publications] M.Shibata,A.Kamiya: "A phosphorescence measurement of tissue oxygen distribution in the rat cremaster muscle." Proc.Eur.Microcirc.177-182 (1998)
[Publications] S.Ichioka,M.Shibata,K.Kosaki,Y.Sato,K.Harii,A.Kamiya: "In vivo measurement of morphometric hemodynamic changes in the microcirculation during angiogenesis under chronic α1-adrenergic blocker treatment." Microvasc.Res.55. 165-174 (1998)
[Publications] T.Takahashi,M.Shibata,A.Kamiya: "Mechanism of macromolecule concentration in collecting lymphatics in rat mesentery." Microvasc.Res.54. 193-205 (1997)
[Publications] N.Satake,M.Shibata,S.Shibata: "Endothelium-and cytochrome P-450-dependent relaxation induced by isoproterenol in rat aortic rings." Eur.J.Pharmacol.319. 37-41 (1997)
[Publications] N.Satake,M.Shibata,S.Shibata: "The involvement of K_<Ca>,K_<ATP> and K_v channels in vasorelaxing responses to acetylcholine in rat aortic rings." Gen.Pharmacol.28. 453-457 (1997)

1998 Fiscal Year Annual Research Report

2軸レーザ照明蛍光生体顕微鏡法による巨大分子の毛細血管壁透過機序の解明

Principal Investigator

柴田 政廣 東京大学, 大学院・医学系研究科, 講師 (60158954)

Research Products

[Publications] M.Shibata,S.Ichioka,A.Kamiya: "Dual-beam laser illuminator of fluorescence microscope for in vivo microcirculation studies." Med.& Biol.Eng.& Comput.37(in press). (1999)

[Publications] M.Shibata,A.Kamiya: "A phosphorescence measurement of tissue oxygen distribution in the rat cremaster muscle." Proc.Eur.Microcirc.177-182 (1998)

[Publications] S.Ichioka,M.Shibata,K.Kosaki,Y.Sato,K.Harii,A.Kamiya: "In vivo measurement of morphometric hemodynamic changes in the microcirculation during angiogenesis under chronic α1-adrenergic blocker treatment." Microvasc.Res.55. 165-174 (1998)

[Publications] T.Takahashi,M.Shibata,A.Kamiya: "Mechanism of macromolecule concentration in collecting lymphatics in rat mesentery." Microvasc.Res.54. 193-205 (1997)

[Publications] N.Satake,M.Shibata,S.Shibata: "Endothelium-and cytochrome P-450-dependent relaxation induced by isoproterenol in rat aortic rings." Eur.J.Pharmacol.319. 37-41 (1997)

[Publications] N.Satake,M.Shibata,S.Shibata: "The involvement of K_<Ca>,K_<ATP> and K_v channels in vasorelaxing responses to acetylcholine in rat aortic rings." Gen.Pharmacol.28. 453-457 (1997)

柴田政廣東京大学, 大学院・医学系研究科, 講師 (60158954)