1997 Fiscal Year Annual Research Report
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09770184
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| Research Institution | Kagawa Medical School |
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Principal Investigator |
松下 治 香川医科大学, 医学部, 助手 (00209537)
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| Keywords | Clostridium histolyticum / コラゲナーゼ / コラーゲン / コラーゲン結合ドメイン |
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| Research Abstract |
ガス壊疸菌群によるガス壊疸感染巣の成立と周辺組織への浸潤には、起因菌の産生するコラゲナーゼが重要な役割を演じると考えられる。本酵素の構造活性相関を明らかにし、その知見を予防に応用することが本研究の課題である。
平成9年度は、本酵素群のうちの一つ(C.histolyticum ColH,クラスI酵素)が、N末側の水解活性ドメインとC末側のコラーゲン結合ドメイン(CBD)により構成されていることを明らかにした。ついで2種類の酵素(C.histolyticum ColGおよびColH)から種々の長さのC末端領域を生産し、そのコラーゲン結合能を測定したところ、クラスI酵素(ColG)ではデュプリケ-トして、クラスI酵素(ColH)では単独で存在するC末端領域(約120アミノ酸残基)がCBDの最小構成単位であることが明らかとなった。この領域のペプチドを精製して家兎を免役し抗体画分を精製した。現在、この領域でよく保存されているアミノ酸残基を順次アラニンに部位特異的に置換し、変異酵素を生産しようとしているところである。
平成10年度は、これらの変異ペプチドの基質結合能を測定し、基質と直接相互作用している部位を特定することから研究を開始したい。また得られた抗体をもちいてマウスを受動免役し、これがガス壊疸菌群のマウス致死活性に影響を与えるか否かを検討して、本研究の最終課題の解決に近づければと考えている。
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