1997 Fiscal Year Annual Research Report
細胞融合制御因子(FRP-1)リガンドの同定及びFRP介在の細胞融合機構の解明
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09770204
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| Research Institution | Mie University |
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Principal Investigator |
河野 光雄 三重大学, 医学部, 講師 (00234097)
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| Keywords | Fusion Regulatory Protein / FRP / 細胞融合 / 巨細胞 / リガンド |
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| Research Abstract |
本研究では、細胞接着因子としての機能を有し、細胞融合制御システムの一部として存在するFusion Regulatory Protein-1(FRP-1)に対するリガンドを同定するとともに、トランスメンブレン領域の欠如したFRP-1発現細胞株にみられる巨細胞形成能を解析し、FRP-1介在の細胞融合制御機構の解明を目的に研究を行った。
まず本年度は、Lac Switch Inducible Mammalian Expression Systemを用いて、分泌蛋白としてのFRP-1(sFRP-1)を発現誘導できるL929細胞株を樹立した。この系において、FRP-1リガンドの同定のために用いるプローブとしてのsFRP-1の精製とトランスメンブレン領域の欠如したFRP-1発現細胞株にみられた巨細胞化現象の解析が可能になった。その結果、この巨細胞化現象はFRP-1に特異的なものではなく用いた細胞と発現ベクターにおけるプロモーターとの相同性によるものであることが示唆された。また、発現に用いたTagに対する抗体で精製したsFRP-1をプローブとして、各種細胞におけるFRP-1リガンドの分布を調べたところ、骨芽細胞に多く分布しそのなかでも特にHSOS-1細胞で多く発現していることが解った。しかしながらこの系では、大量のsFRP-1の発現は期待できずアフィニティーカラム等への応用は困難であった。そこで、現在、センダイウイルスベクター(東大医科研、永井教授より分与)を用いてsFRP-1の大量発現を行っており、これによりHSOS-1由来のmRNA及び蛋白からのスクリーニング(パンニング、アフィニティーカラム等)への応用が可能になると考えられる。
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[Publications] Kousuke Okamoto: "An anti-fusion regulatory protein-1 monoclonal antibody suppresses human parainfluenza virus type 2-induced cell fusion." Journal of General Virology. Vol.78. 83-89 (1997)
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[Publications] Kousuke Okamoto: "Paramyxovirus-induced syncytium cell formation is suppressed by a dominant negative fusion regulatory protein-1 (FRP-1)/CD98 mutated construct." Journal of General Virology. Vol.78. 775-783 (1997)
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[Publications] Kousuke Okamoto: "Enhancement of human parainfluenza virus-induced cell fusion by pradimicin, a low molecular weight mannose-binding antibiotic." Medical Microbiology and Immunology. Vol.186. 101-108 (1997)
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[Publications] Shigeru Suga: "Human immunodeficiency virus type-1 envelope glycoprotein gp120 induces expression of fusion regulatory protein (FRP)-1/CD98 on CD4+ T cells." Medical Microbiology and Immunology. Vol.186. 237-243 (1997)
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[Publications] Machiko Nishio: "Human parainfluenza virus type 2 phosphoprotein: Mapping of monoclonal antibody epitopes and location of the multimerization domain." Journal of General Virology. Vol.78. 1303-1308 (1997)
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[Publications] Morihiro Ito: "Role of a single amino acid at the amino terminus of the simian virus 5 F2 subunit in syncytium formation." Journal of Virology. Vol.71. 9855-9858 (1997)
