血管内皮細胞におけるエストロゲンのプロスタサイクリン合成機構に及ぼす影響の解明

1997 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 09770511
• Research Institution: Tokyo Women's Medical University
• Principal Investigator: 佐藤 加代子 東京女子医科大学, 医学部, 助手 (20246482)
• Keywords: 血管内皮細胞 / エストロゲン / COX-2 / プロスタサイクリン

Research Abstract

エストロゲンの抗動脈硬化作用の一つとしてin vitroではヒト血管内皮細胞やラット大動脈平滑筋細胞においてエストロゲンがプロスタサイクリン合成を増加させることが知られている。しかし、エストロゲンがプロスタサイクリン合成を亢進させる際に、シクロオキシゲナーゼを誘導するメカニズムについては未だに解明されていない。そこで本年度は培養ヒト臍帯静脈血管内皮細胞(HUVEC)を用いて、COXのエストロゲンによる誘導を調べた。
1、アスピリン酸1mM処理後、1%serum、1%serum+E_2 10^<-8>M+β-cyclodexitrin0.5nM、5%serum+TPAl00ng/mlで各々3h、6h、24h、48h培養後、アラキドン酸3μg/ml±NS-398 10^<-7>M添加し培養液の6-ketoPGF_1αをELISA法にて測定した。TPA処理では6h後に-6ketoPGF_1α産生はPeakとなり急激に低下し、48hではほとんど産生されなかったが、serumおよびE2処理では6-ketoPGF_1α産生は時間経過とともに増加した。また6-ketoPGF_1α産生はTPA、E_2ともにCOX-2のinhibitorであるNS-398で3hは部分的に抑制されたが、48hは抑制されなかった。2.Serum、TPA、E_2でHUVECを同様に処理後、COX-2mRNAの変動をcompetitive RT-PCRにて検討した。誘導型であるCOX-2mRNAはserum処理細胞では変動が認められなかったが、TPA処理細胞では3hをprakに徐々にその発現が減少した.一方E_2では二峰性の発現の増加が認められ、そのpeakは3h>24hであった。すなわちエストロゲン処理により時間経過とともに血管内皮におけるプロスタサイクリン合成は増加しているにもかかわらず、COX-2mRNAの発現は増加していなかった。来年度はCOX-1mRNAの発現の時間経過を明らかにするとともにCOXmRNAの発現調節を転写因子レベルで解明する。

Research Products

• [Publications] K.Sato, I.Morita, H.Kasanuki, S.Murota: "Effect of estrogen on synthesis of prostacyclin in cultured bovine endothelial cells" Atherosclerosis. vol.134. 246 (1997)