1997 Fiscal Year Annual Research Report
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09771754
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| Research Institution | Nagoya University |
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Principal Investigator |
重冨 俊雄 名古屋大学, 医学部, 助手 (80273225)
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| Keywords | 高齢者 / 口腔乾燥症 / 薬剤性 / 唾液腺 / 唾液腺培養 / 増殖能 / 3T3細胞 |
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| Research Abstract |
平成9年度:唾液腺培養細胞増殖能に対する薬物の影響
1,顎下腺細胞培養
唾液腺細胞の培養は、畠らの粘膜上皮細胞培養法に準じて、3T3細胞をfeeder layerとして用いた。
(1)形態学的検討
培養上皮細胞は3T3細胞を排除しながら徐々に増殖し、培養20日日にはコンフルエントとなった。この時期には3T3細胞は完全に消失しており、2継代目からは上皮細胞のみの培養が可能となった。その後、35mm径培養デイッシュにて3T3細胞を用いず継代を行ったが、細胞は良好な増殖を示し8日でコンフルエントとなった。培養細胞はPeriodic Acid Schiff(PAS)染色において陽性像を示した。また、透過型電子顕微鏡像においても、分泌顆粒を認めた。
(2)免疫組織化学的検討
免疫染色により、培養細胞は抗アミラーゼ抗体ならびに一部の抗サイトケラチン抗体(Ck MNF,Ck HMW)に陽性を示した。しかし、他の抗サイトケラチン抗体および抗ミオシン抗体には反応を認めなかった。
2,増殖能の検討
増殖能を検討するため、経時的な総細胞数の変化を計測した。また、ブロモデオキシウリジン(BrdU)の取り込み能をを用いた検討も行った。
(1)細胞数の検討
細胞数は培養2日目より増加し、10日目以降プラトーとなった。
※現在、コントロールのデータがそろい、薬物の影響に関する実験に入ったところである。
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