Smith-Lemli-Opitz症候群でのコレステロール代謝異常の解析 -7-デヒドロコレステロールレダクターゼの機能異常-

1998 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 09780558
• Research Institution: Hokkaido University
• Principal Investigator: 西野 秀昭 北海道大学, 医学部, 助手 (40198487)
• Keywords: Smith-Lemli-Opitz症候群 / コレステロール / 7-デヒドロコレステロール / 小胞体膜 / ステロール14レダクターゼ / HMGCoAレダクターゼ / ステロール感受性ドメイン / NADPH-シトクロムP-450レダクターゼ

Research Abstract

7-デヒドロコレステロールレダクターゼ(7R)は知恵遅れや発生異常を特徴とするSmith-Lemli-Opitz症候群の原因遺伝子と考えられている。7Rは補酵素としてNADPHを必要としているが、NADHでも反応が起こることや7R活性は小胞体膜に結合していることから、小胞体膜電子伝達系の関与が考えられた。そこでNADPH-シトクロムP-450レダクターゼ(fpT)に対する特異抗体とインキユベーションしたところ、7R活性が低下した。小胞体膜の中性界面活性剤による可溶化上清をDEAEセルロース力ラムでクロマトグラフイーを行ったところ、7R活性は精製したfpT存在下でのみ検出された。また小胞体膜を各種プロテアーゼで処理すると、7R活性は消失したが、精製fpTを加えることによって活性が回復した。以上のことから、7R活性は少なくとも7R分子とfpTから構成されていることが明らかになった。また7RcDNAの塩基配列から推定されたアミノ酸一次構造を他のホモロジーの高いタンパク質、ステロール14レダクターゼやラミンBレセプターと比較したところ、7R活性に特異的と考えられるアミノ酸配列が見い出された。またN末端アミノ酸は細胞質側に存在し、10回膜を貫通して細胞質ドメインを持つことが予想された。またジヌクレオチド結合モチーフは見い出されなかったが、ステロール感受性ドメイン様構造が第7番膜貫通部位に存在していた。7RはHMGCoAレダクターゼと同様7-デヒドロコレステロール水酸化物による活性調節を受ける可能性が示唆された。