1997 Fiscal Year Annual Research Report
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09835023
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Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Research Institution | Tokyo Metropolitan Institute of Gerontology |
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Principal Investigator |
小河原 緑 財)東京都老人総合研究所, 神経生理, 助手 (60100111)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
白澤 卓二 財)東京都老人総合研究所, 神経生理, 室長 (80226323)
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| Keywords | プレセニリン / アルツハイマー病 / モデルマウス / アイソフォーム / ES細胞 / ターゲットコンストラクト / 相同組換え / 点突然変異 |
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| Research Abstract |
プレセニリン遺伝子は14番染色体に存在する家族性アルツハイマー病の原因遺伝子として1995年に単離・同定された。プレセニリン染色体遺伝子に発見された点突然変異は早期発症型の家族性アルツハイマー病を引き起こすと考えられているが、その発症のメカニズムに関しては未だに不明である。本研究課題の目的は、マウスのプレセニリン1遺伝子に変異を導入して、アルツハイマー病のモデルマウスを作製・解析する事にある。同時に、我々がこれまでに明らかにしてきたプレセニリンのアイソフォームの組織特異的役割を明らかにする目的で、脳型アイソフォームを全て肝臓型アイソフォームで置換したマウスも作製し、各プレセニリンアイソフォームの役割を明らかとする。平成9年度はマウスゲノムライブラリーよりマウスプレセニリン1遺伝子を単離し、エクソン8-10のゲノム構造を決定した。更にエクソン9をネオマイシンに置換したエクソン9欠失型PS1ターゲットコンストラクトおよびエクソン9にヒトのPS1-374型cDNAを挿入した374型PS1ターゲットコンストラクトを作製した。それぞれのコンストラクトを129由来のES細胞に遺伝子導入し、G418耐性のクローンを選択した。これらのクローンに対してサザンブロット解析を行い、相同組換えによりエクソン9が欠失したESクローンおよび374型に置換されたESクローンを確立した。現在、凝集法でこれらのESクローンからB57BLACK/6とのキメラマウスを作製している。
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[Publications] Inagaki,N.et al.: "Spatial patterns of Ca2+signals define intracellular distribution of a signaling by Ca2+/Calmodulin-dependent protein kinase II." J.Biol.Chem.272. 25195-25199 (1997)
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[Publications] Smith,C.D.et al.: "Crystallization and preliminary cryogenic X-ray diffraction analyses of protein L-isoaspartyl O-methyltransferase from human fetal brain." Proteins. 28. 457-460 (1997)
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[Publications] Mukouyama,Y.et al.: "Protein Tyrosine Phosphatase Epsilon (PTPe);Possible Involvement in Neural Function." Mol.Brain Res.50. 230-236 (1997)
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[Publications] Shimizu,E.et al.: "Glutamate dehydrogenase mRNA is immediately induced after phencyclidine treatment in the rat brain." Schizophrenia Res.25. 251-258 (1997)
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[Publications] Yamamoto,A.et al.: "Deficiency in Protein L-isoaspartyl Methyltransferase Results in a Fatal Progressive Epilepsy." J.Neurosci.18. 2063-2074 (1997)
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[Publications] Tagawa,M.et al.: "Identification of a Receptor-type Protein Tyrosine Phosphatase Expressed in Postmitotic Maturing Neurons:Its Structure and Developmental Expression in Central Nervous System." Biochem.J.321. 865-871 (1997)
