1997 Fiscal Year Annual Research Report
金属イオンの利用形態の進化と多様性に関する自然史科学的解析
Project/Area Number |
09839017
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Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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Research Institution | Hiroshima University |
Principal Investigator |
宇山 太郎 広島大学, 理学部, 講師 (60232914)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
金森 寛 富山大学, 理学部, 教授 (00019001)
道端 齋 広島大学, 理学部, 教授 (00111740)
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Keywords | ホヤ / バナジウム / 濃縮機構 / 還元機構 / ペントースリン酸経路 |
Research Abstract |
海産の脊索動物のホヤと環形動物のエラコは、高濃度かつ高選択的にバナジウムを濃縮している。ホヤのバナジウム濃縮細胞(バナドサイト)を抗原とするモノクローナル抗体とバナジウム結合タンパク質を抗原とするポリクローナル抗体に反応する抗原が、エラコにも存在する。 そこで、脊索動物のホヤと環形動物のエラコに共通な金属濃縮機構が存在するか否かを調べるために、共通性の見られたタンパク質について、それぞれ遺伝子クローニングを行った。その結果、バナドサイトに対するモノクローナル抗体の認識する抗原タンパク質は、ペントースリン酸経路の3番目の酵素の6PGDHであることが判明した。また、この経路の最初の酵素のG6PDHもバナドサイトに局在することを見い出した。これら2つの酵素は、生体内還元剤のNADPHを生成し、NADPHは5価のバナジウムを4価に還元する能力を有する。それゆえ、バナドサイトにおいてバナジウムの5価から4価への還元には、NADPHが利用されている可能性が高い。現在、この可能性を確かめるため、バナドサイトにNADPHが局在するのか否か、細胞内NADPH量の測定を試みている。 一方、ホヤの血球から抽出した3種類のバナジウム結合タンパク質(VAP)に関して、遺伝子クローニングを行った結果、12.5kDaと15kDaのVAPをコードするcDNAの全長を明らかにすることに成功した。これら2つのVAPは120アミノ酸からなっており、それぞれ15%と16%のシステインを含んでいた。ホモロジー解析の結果、これらのVAPに相同な遺伝子やタンパク質は見いだせず、新規のタンパク質であると考えられる。今後、残りの16kDaのVAPのクローニングを行い、これらのVAPの存在を遺伝子レベルでエラコや他の生物について調べて行きたい。
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[Publications] Uyama,T: "6-Phosphogluconate dehydrogenase is a 45 kDa-antigen recognized by a monoclonal antibody S4D5 specific to vanadocytes in the vanadium-rich ascidian,Ascidia sydneiensis samea." The Journal of Biochemistry. (in press.). (1998)
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[Publications] Uyama,T: "Glucose-6-phosphate dehydrogenase in the pentose phosphate pathway is localized in vanadocytes of vanadium-rich ascidian,Ascidia sydneiensis samea." Zoological Science. (in press.). (1998)
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[Publications] Michibata,H.: "Selective accumulation of vanadium by ascidians from sea water. In “Vanadium in the Environment. Part 1:Chemistry and Biochemistry"" Edited by Nriagu J O,John Wiley & Sons,Inc.(in press), (1997)
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[Publications] Michibata,H.: "The accumulation mechanism of vanadium by ascidians. In “Proc.Symp.Chemistry,Biochemistry and Therapeutic Applications of Vanadium Compounds." Edited by Tracey,A.and Crans,D.C.,Am.Chem.Soc.(in press), (1997)