金属イオンの利用形態の進化と多様性に関する自然史科学的解析

1998 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 09839017
• Research Institution: Hiroshima University
• Principal Investigator: 宇山 太郎 広島大学, 理学部, 講師 (60232914)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 植木 龍也 広島大学, 理学部, 助手 (10274705) ; 金森 寛 富山大学, 理学部, 教授 (00019001) ; 道端 齊 広島大学, 理学部, 教授 (00111740)
• Keywords: 原索動物 / 環形動物 / 金属結合タンパク質 / 組み換えタンパク質 / 遺伝子 / バナジウム / サザンプロット

Research Abstract

地球上には92種類を超える元素が存在する。生命体はこれらの元素の中から約30種類の元素を選択的に利用している。長い進化の過程において生命体による金属イオンの選択は,そのときどきの環境に応じて変化してきた。今から約90年前に脊椎動物ホヤの血球から高濃度のバナジウムが検出された。その生理学的意義はいまだ不明な点が多いが,近年系統学的に遠い位置にある環形動物エラコに高濃度のバナジウムが濃縮されていることがわかり,生物界にあまり例を見ないバナジウムの選択的利用が脚光を浴びることとなった。
本研究では,脊椎動物と環形動物に共通のバナジウム濃縮機構があるか否かを解析することを目的として,次のような成果を得た。
(1) バナジウム結合タンパク質(VAP)からバナジウムを除去したアポタンパク質を作製し再結合実験をしたところ,10原子のバナジウムが結合することを見いだした(未発表)。
(2) バナジウム結合タンパク質(VAP)のうち,12.5kDaと15kDaをコードする遺伝子の配列を明らかにした(未発表)。
(3) VAP遺伝子を発現ベクターに組み込み融合タンパク質を合成した(未発表)。
(4) VAP遺伝子をプローブとしてサザンプロット解析を行うために,エラコのゲノムDNAの抽出を試みた。

Research Products

• [Publications] Michibata,H.: "Vanadocyte is a cell holding the key to resolve the highly selective accumulation and reduction of vanadium in ascidians." Microscop.Res.Technol.in press.(1999)
• [Publications] Michibata,H.: "The accumulation mechanism of vanadium by ascidians-An interdisciplinary stydy between biology and chemistry on extraordinary high levels and reduced form of vanadium in vanadocvtes." Am.Chem.Soc.Symp.Ser.711. 248-258 (1998)
• [Publications] Michibata,H.: "Selective accumulation of vanadium by ascidians from seawater." Adv.Environm.Sci.& Technol.edit.Nriagu J.John Wiley & Sons,Inc.217-249 (1998)
• [Publications] Ueki,T.: "Isolation of cDNAs encoding subunits A and B of the vacuolar-type ATPase from the vanadium-rich ascidian,Ascidia sydneiensis samea." Zool.Sci.15. 823-829 (1998)
• [Publications] Uyama,T.: "A 100-kDa antigen recognized by a newly prepared monoclonal antibody specific to the vanadocytes of the vanadium-rich ascidian,Ascidia sydneiensis samea,is glycogen phosphorvlase." Zool.Sci.15. 815-821 (1998)
• [Publications] Uyama,T.: "Glucose-6-phosphate dehydrogenase in the pentose phosphate pathway is localized in vanadocytes of the vanadium-rich ascidian,Ascidia sydneiensis samea." Zool.Sci.15. 441-446 (1998)
• [Publications] Uyama,T.: "6-phosphogluconate dehydrogenase is a 45 kDa-antigen recognized by a monoclonal antibody S4D5 specific to vanadocytes in the vanadium-rich ascidian,Ascidia sydneiensis samea." J.Biochem.124. 377-382 (1998)
• [Publications] 道端 齊: "ホヤのバナジウム濃縮に携わる特異な細胞、バナドサイトの謎を探る." 生物物理. 37. 315-320 (1997)
• [Publications] Uyama,T.: "Highly selective accumulation of vanadium by ascidians from sea water -An approach from concerted study between biological and chemical viewpoint." Proc.I.T.I.T.Int.Symp.New Technol.Marine-Sphere. 75-78 (1997)
• [Publications] Kanamori,K.: "Reduction of vanadium(IV)to vanadium(III)by cysteine methyl ester in water in the presence of amino polycarboxylates." Chem.Letters. 423-424 (1997)
• [Publications] Wuchiyama,J.: "Preparation and Iocalization of a monoclonal antibody against a vanadium-associated protein extracted from the blood cells of the vanadium-rich ascidian,Ascidia sydneiensis samea." Zool.Sci.14. 409-414 (1997)
• [Publications] Nose,Y.: "Specific increase in the number of vanadium-accumulating blood cells by some ionophores and inhibitors of proton-ATPases in the ascidian,Ascidia sydneiensis samea." Zool.Sci.14. 199-204 (1997)
• [Publications] Kanda,T.: "Identification of a vanadium-associated protein from the vanadium-rich ascidian,Ascidia sydneiensis samea." Zool.Sci.14. 37-42 (1997)
• [Publications] Uyama,T.: "Finding of the same antigen in the polychaeta,Pseudopotamilla occelata,as those in the vanadium-rich ascidian,Ascidia sydneiensis samea." Zool.Sci.14. 43-47 (1997)