反復配列を用いたオオサンショウウオ科の3種の系統関係と種内変異

1997 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 09839035
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• Research Institution: Toho University
• Principal Investigator: 河野 晴一 東邦大学, 理学部, 教授 (70057644)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 久保田 宗一郎 東邦大学, 理学部, 助手 (30277347)
• Keywords: オオサンショウウオ / チュウゴクオオサンショウウオ / アメリカオオサンショウウオ / 反復配列 / 系統関係 / 種内変異 / Hin dIII / 塩基配列

Research Abstract

現存するオオサンショウウオ科(Cryptobranchidae)Andrias属のオオサンショウウオ(Andrias japonicus)、チュウゴクオオサンショウウオ(A.davidianus)、とCryptobranchus属のアメリカオオサンショウウオ(Cryptobranchus alleganiensis)の系統関係をゲノムDNAの反復配列を用いて再検討すべく、A.japonicus5個体、A.davidianus2個体、C.alleganiensis1個体の、計8個体からDNAを抽出・精製し、多数の制限酵素で処理後、電気泳動、サザンブロットハイブリダイゼーション等を行った。共通した反復配列が存在するかどうかを指標として検討した結果、3種間の関係は従来の分類と同様に、A.japonicusとA.davidianusがより近縁であることが示唆された。
次に、3種に共通して存在する約130bpのHin dIII断片をクローニングし、塩基配列の決定を行った。全79配列を比較解析処理し、近隣接合法等の系統樹の作成を試みたが、C.alleganiensisの配列以外はクラスターを形成しなかった。A.davidianus2個体が1つのグループを形成できず、また、A.japonicusの各個体間の位置関係も用いた系統樹ごとに異なっていた。今回用いた配列は3種間で保存されていることから、3種が分化する前から存在したと考えられる。しかし、その後種分化が生じた後も種の独自性を生まなかったことは、種分化後の増幅や協調がほとんど無かったことを示唆している。
次年度は、他の反復配列である5SrDNAの解析を行い、種間並びにA.japonicusの各地域間における系統関係の検討をおこなう。