導入遺伝子の発現を光で人為的に制御できる植物葉緑体形質転換系の開発

1997 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 09874170
• Research Institution: Kyoto University
• Principal Investigator: 豊島 喜則 京都大学, 大学院・人間・環境学研究科, 教授 (60013166)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 椎名 隆 京都大学, 大学院・人間・環境学研究科, 助手 (10206039)
• Keywords: 葉緑体 / 形質転換 / 青色光 / プロモーター

Research Abstract

標的遺伝子の発現を任意にコントロールできる葉緑体形質転換系を開発することを目的として、平成9年度は葉緑体光誘導プロモーターの構造解析と葉緑体形質転換効率の改善を目指した研究を行った。
1)in vitro転写系を用いて複数の葉緑体プロモーターの構造を解析し、光照射下で強い活性を示す特異的なプロモーター構造を明らかにした。その結果、-10領域のすぐ上流に存在するExtended-10プロモーター構造が重要であることを明らかにした。
2)パ-チィクルガンを用いたタバコ葉への一過的な遺伝子導入効率を最適化することに成功した。
3)葉緑体にスペクチノマイシン耐性を付加するaadA遺伝子を持つコンストラクトを葉緑体に導入し、スペクチノマイシン耐性をマーカーとして葉緑体形質転換体の選択を行った。現在、導入遺伝子の確認を行っている。
4)葉緑体の青色光応答プロモーターをレポーター遺伝子であるGFPの上流につないだ葉緑体形質転換コンストラクトの作成を行った。

Research Products

• [Publications] Satoh,J.et.al: "characterization of dynamics of the pabD light-induced transcription in wheat chloroplasts." Plant Holecular Biology. 33. 267-278 (1997)
• [Publications] Ozawa,S.et al.: "Role of L protein (psbL gene product) in regulation of electron transter at the reducing side of photosystem II.I" Plant Holecular Biology. 34. 151-161 (1997)
• [Publications] Hoshida,H.et al.: "Electro paramagnetic rescrance and mutaticnal analyses revealed the involvoment of photosystem II-L subumt in the oxidation step of tyrz by P680^+ to from the tyr-Z^+ P680^+ state in photosystem II" Biochemistry. 36・40. 12053-12061 (1997)
• [Publications] Shiina,T.et al.: "Identitication of promoter elements involved in the cytosolic Ca^<2+> mediated photoregulation of maize cab-ml expresslon" Plant Physiology. 115. 477-483 (1997)
• [Publications] 中平洋一.豊島喜則: "葉緑体における転写制御機構" 日本農芸化学会誌. 71.11. 28-31 (1997)