1997 Fiscal Year Annual Research Report
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09875191
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| Research Institution | Kyushu University |
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Principal Investigator |
久保田 富生子 九州大学, 工学部, 助手 (60294899)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
中塩 文行 熊本工業大学, 工学部, 教授 (70037729)
栫 隆彦 九州大学, 工学部, 助手 (20233679)
後藤 雅宏 九州大学, 工学部, 助教授 (10211921)
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| Keywords | 逆ミセル / タンパク質 / 抽出 / 分離 / 分子集合体 / バイオテクノロジー / 酵素 / AOT |
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| Research Abstract |
本研究では、新しく開発した水相pHに応答性を示す界面活性剤ジオレイルリン酸(DOLPA)からなる逆ミセルのタンパク質分離への応用に焦点を絞り研究を展開した。有機媒体中に自発的に形成される分子集合体の一種である逆ミセルは、生体高分子であるタンパク質の抽出分離操作を可能にした。逆ミセルを形成する代表的な界面活性剤としては,AOT(ジ-2-エチルヘキシルスルホコハク酸ナトリウム)が挙げられるが、本研究で開発したDOLPAは,従来抽出が困難であった分子量5万以上のタンパク質の有機相中への可溶化を可能にした。また、水相pHの変化によって、逆ミセルの形成-崩壊を制御することができた.この逆ミセルのスイッチング現象は、界面活性剤親水部のリン酸部位の酸解離によってもたらされることが、明らかとなった.逆ミセル抽出法は、従来の溶媒抽出法と同様に正抽出操作と逆抽出操作の二段階の抽出操作によって構成されるが、タンパク質などのいわゆる生理活性物質の分離操作として応用する場合、最終的に回収された溶液中における生理機能(酵素活性)の維持が大きな問題となってくる。このような観点から、回収されたタンパク質の生理活性を、いかに保持するかが工業的分離操作として利用できる鍵を握っている。本研究で開発した逆ミセル系においては、最適な条件下で抽出分離操作を行うことによって、回収したタンパク質の酵素活性がほとんど保持されていることを確認できた。
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[Publications] M.Goto et al.: "Application of reversed micelles in bioengineering" Current Opinion in Colloid & Interface Science. 2・4. 397-401 (1997)
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[Publications] M.Goto et al.: "Design of surfactants suitable for protein extraction by reversed micelles" Biotechnology and Bioengineering. 54・1. 26-32 (1997)
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[Publications] M.Goto et al.: "Novel liquid immobilized enzymes as a nanostructural bioreactor" Biotechnology Techniques. 11・3. 141-143 (1997)
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[Publications] F.Kubota and M.Goto et al.: "Separation of Polyunsaturated Fatty Acid Using a Hollow Fiber Membrane Extractor" Separation Science and Technology. 32・9. 1529-1541 (1997)
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[Publications] M.Goto et al.: "Protein refonding by reversed micelles utilizing solid-liquid extraction technique" Biotechnology and Bioengineering. 57・5. 620-623 (1998)
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[Publications] M.Goto et al.: "Extraction and activity of-chymotrypsin using mixed reversed micellar sysytems" Biotechnology Progress. 14・3. 印刷中 (1998)
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[Publications] 久保田富生子、後藤雅宏: "抽出技術集覧" 化学工業社, 70-73 (1997)
