1997 Fiscal Year Annual Research Report
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09876013
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| Research Institution | Nagoya University |
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Principal Investigator |
柘植 尚志 名古屋大学, 農学部, 助教授 (30192644)
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| Keywords | 植物病原糸状菌 / Fusarium oxysporum / トランスポゾン / トランスポゾンタギング |
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| Research Abstract |
トランスポゾンは、各種生物における遺伝子単離の強力なツールとして利用されている。いわゆるトランスポゾンタギングである。申請者らは、ユウガオつる割病菌(Fusarium oxysporum f.sp.lagenariae)から、これまで病原糸状菌では全く報告されていなかったAcタイプトランスポゾン様配列(Tfolと命名)を単離した。本研究では、Tfol配列を用いた糸状菌の遺伝子タギング法の確立を目指し、以下の研究を行った。
1.Fusarium oxysporumの各種分化型におけるTfo1様配列の分布
F.oxysporumの各種分化型におけるTfo1様配列の分布をサザンハイブリダイゼーションとPCR法を用いて調査した。その結果、ユウガオつる割病菌だけでなく、用いた10分化型のすべての菌株からTfo1様配列が検出され、本配列がF.oxysporumに広く分布していることが明らかとなった。
2.Tfo1からの転写RNAの検出
Tfo1にはトランスポゼ-ス様タンパク質の読み枠(ORF1)が存在する。ユウガオつる割病菌とトマト根腐萎ちょう病菌(f.sp.radicis-lycopersici)について、ノーザンハイブリダイゼーションとRT-PCR法を用いてORF1の転写RNAの検出を試みた。その結果、どちらの分化型からも転写RNAが検出され、ORF1がトランスポゼ-ス遺伝子として機能していることが示された。以上の結果は、Tfo1がトランスポゾン活性を有すること、さらに糸状菌のトランスポゾンタギングに利用できることを強く示唆した。そこで現在、Tfo1配列を組み込んだ形質転換ベクターを各種糸状菌に導入し、遺伝子タギングを試みている。
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[Publications] Kaneko,I.: "Structural analysis of the plasmid pAAT56 of the filamentous fugus Alternaria alternata" Gene. 203(1). 51-57 (1997)
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[Publications] Katsuya,S.: "Circular DNA plasmid in the phytopathogenic fungus Alternaria alternata:temperature-dependent curing and association with pathogenicity" Genetics. 146(1). 111-120 (1997)
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[Publications] Kawamura,C.: "The melanin biosynthesis genes of Alternaria alternata can restore pathogenicity of the melanin-deficient mutants of Magnaporthe grisea" Molecular Plant-Microbe Interactions. 10(4). 446-453 (1997)
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[Publications] Kusaba,M.: "Mitochondrial DNA variation in host-specific toxin-producing pathogens in the genus Alternaria" Annals of the Phytopathological Society of Japan. 63(6). 463-469 (1997)
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[Publications] Takano,Y.: "The Alternaria alternata melanin biosynthesis gene restores appressorial melanization and penetration of cellulose membranes in the albino mutant of Colletotirchum lagenariae" Fungal Genetics and Biology. 21(1). 131-140 (1997)
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[Publications] Tsuge,T.: "Molecular Genetics of Host-Specific Toxins in Plant Disease" Kohmoto,K.and Yoder,O.C.eds.,Kluwer Academic Publishers(印刷中), (1998)
