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1997 Fiscal Year Annual Research Report

ヒトTNF遺伝子を導入したヒト繊維芽細胞の抗腫瘍効果

Research Project

Project/Area Number 09877045
Research InstitutionOkayama University

Principal Investigator

難波 正義  岡山大学, 医学部, 教授 (80069004)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 近藤 格  岡山大学, 医学部, 助手 (30284061)
三原 浩一郎  岡山大学, 医学部, 助手 (50229788)
KeywordsTNF-α / Human cells / Transfection / Cancer treatment / Radicals / Antioxydant / In Vitro
Research Abstract

我々はより強いヒトTNF-α発現ベクターを得るために、強力なプロモーター活性を持つSRαプロモーターの下流にヒトTNF-α遺伝子をつないだ発現ベクターpCDL81/TNFを作成した。pCDL81/TNFをヒト線維芽細胞株(KMST-6)に導入し、ヒトTNF-α発現細胞(KMST-6/TNF)を樹立した。この細胞の培養上清はin vitroで形質転換したKMST-6/RASやKMST-6T細胞、肝癌、奇形腫、肺癌などのヒト癌由来の細胞株の増殖を抑制したが正常線維芽細胞の増殖は抑制しなかった。また、得られた培養上清には10-60JRU/mlのTNF-αを含み、その増殖抑制活性はTNF-αの中和抗体で中和される。
KMST-6/TNFの培養上清のKMST-6/RASに対する細胞増殖抑制活性は抗酸化剤Butylated hydroxyanisoleによって阻害されたので活性酸素が関与していると考えられる。また、1%の酸素濃度の培養条件でも増殖抑制効果が十分維持されていた。
これらの結果から、TNF-α産生ヒト線維芽細胞の培養上清はin vitroで癌細胞に対し強い増殖抑制効果を示し、一方正常細胞の増殖に影響を与えず生理的な酸素濃度でも十分効果を示すことが明らかになった。今後、我々が考案している線維芽細胞にTNF-α遺伝子を導入し、この線維芽細胞の由来した元の個体に戻し移植する癌治療プロトコールの有効性が期待できるので、ヌードマウスなどを用いたin vivoの実験を進める予定である。

  • Research Products

    (6 results)

All Other

All Publications (6 results)

  • [Publications] Namba,M., et al.: "Transformation of normal human fibroblasts into immortalized cells with the mutant p53 gene and X-rays." Int.J.Cancer. 70. 135-140 (1997)

  • [Publications] Namba,M., et al.: "The telomere lengthening mechanism in telomerase-negative immortal human cells does not involve the telomerase RNA subunit." Hum.Mol.Genet.6. 921-926 (1997)

  • [Publications] Namba,M., et al.: "Screening the p53 status of human cell lines using a yeast functional assay." Mol.Carcinog.19. 243-253 (1997)

  • [Publications] Namba,M., et al.: "The p53 gene status and other cellular characteristics of human cell lines maintained in our laboratory." Tiss.Cult.Res.Commun.16. 173-178 (1997)

  • [Publications] Namba,M., et al.: "Immortalization of mutant p53-transfected human fibroblasts by treatment with either 4-nitroquinoline 1-oxide or X-rays." In Vitro Cell.Dev.Biol.33・7. 628-632 (1997)

  • [Publications] Namba,M., et al.: "Establishment of a human fibroblast cell line producing tumor necrosis factor α (KMST-6/TNF) and growth inhibitory effects of its conditioned medium on malignant cells in culture." In Vitro 1998. (in press).

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Published: 1999-03-15   Modified: 2016-04-21  

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