1997 Fiscal Year Annual Research Report
リンパ球に発現する新しいセリン・スレオニンキナーゼの遺伝子とシグナル伝達系の解析
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09877072
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| Research Institution | Tokyo Metropolitan Organization for Medical Research |
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Principal Investigator |
烏山 一 (財)東京都臨床医学総合研究所, 免疫研究部門, 研究員 (60195013)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
永田 喜三郎 (財)東京都臨床医学総合研究所, 免疫研究部門, 研究員 (10291155)
杭田 慶介 (財)東京都臨床医学総合研究所, 免疫研究部門, 研究員 (70225126)
倉持 敏美 (財)東京都臨床医学総合研究所, 免疫研究部門, 研究員 (90291153)
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| Keywords | LOK / セリン・スレオニンキナーゼ / リンパ球 / シグナル伝達 / MAPキナーゼ / アポトーシス / caspase-3 / ノックアウトマウス |
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| Research Abstract |
免疫系の主役であるリンパ球が造血幹細胞から派生分化してくる段階で発現・機能しているキナーゼ分子を検索するために、プレB細胞株からRT-PCR法によりキナーゼ遺伝子群を増幅したところ、そのうちのひとつが新規のセリン・スレオニンキナーゼをコードする遺伝子であることが判明した。その発現がリンパ球に選択的であることから、この新規キナーゼをlymphocyte-oriented kinase(LOK)と命名した。そのキナーゼドメインが酵母のフェロモンレセプターを介するシグナル伝達経路であるMAPキナーゼカスケードの活性化を制御しているMAPKKKK(STE20)のキナーゼドメインと相同性を示すことから、LOKがリンパ球におけるMAPキナーゼカスケードに関与している可能性が考えられた。しかし、Cos細胞を用いた共発現系においては、哺乳動物で現在までに知られている3つのMAPキナーゼアイソフォーム(ERK、JNK/SAPK、p38)のいずれもLOKによっては活性化されなかった。したがって、LOKによるMAPキナーゼの活性化にはリンパ球に特異的に発現している他の分子の存在が必要である可能性、あるいはLOKが既知のMAPキナーゼカスケードとは異なる経路に関与している可能性が考えられた。LOKのキナーゼドメインのすぐ下流には、アポトーシス際に活性化されるプロテアーゼcaspase-3(CPP32)で切断されうるアミノ酸配列が存在するが、確かにin vitroにおいてLOKがcaspase-3によってその部位で限定分解されることが確認された。さらに、抗Fas抗体刺激によってリンパ球のアポトーシスを誘導した場合にも、実際に、細胞内でLOKが限定分解されることが判明した。アポトーシスとの関連も含め、LOKの生体内での機能を明らかにするために、現在、遺伝子ターゲティングの技術によってLOKノックアウトマウスの作製・解析を進めている。
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[Publications] Kuramochi,S.et al.: "The roles of preB cell receptor in early B cell development and its signal transduction." Immunol.Cell Biol.75. 209-216 (1997)
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[Publications] Karasuyama,H.et al.: "LOK is a novel mouse STE20-like protein kinase that is expressed predominantly in lymphocytes." J.Biol.Chem.272. 22679-22684 (1997)
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[Publications] Nagata,K.et al.: "The Igα/Igβ heterodimer on μ-negative proB cells is competent for transducing signals to induce early B cell differentiation." Immunity. 7. 559-570 (1997)
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[Publications] 烏山 一: "B細胞分化とシグナル伝達" 実験医学増刊号“免疫系のシグナル伝達". 14. 18-24 (1997)
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[Publications] 烏山 一: "リンパ球初期分化におけるシグナル伝達" 最新医学. 52. 8-13 (1997)
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[Publications] 烏山 一: "B細胞分化におけるプレB細胞レセプターシグナルの役割" 蛋白質核酸酵素. 43. 111-118 (1998)
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[Publications] Kuramochi,S.et al.: ""LOK,a novel mouse STE20-like protein kinase that is expressed predominantly in lymphocytes." In Kinases and Phosphatases in Lymphocyte and Neuronal Signaling." Splinger,Tokyo, 354 (1997)
