カイニン酸傷害脳に伴う脳内遺伝子発現に関する研究ースクリーニングと同定ー

1997 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 09877120
• Research Institution: Showa Women's University
• Principal Investigator: 鬼頭 昭三 昭和女子大学, 女性文化研究所, 教授 (00010140)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 仙波 純一 放送大学, 教養学部, 助教授 (30183429)
• Keywords: β-estradiol / cDNA library / differential hybridization / 海馬 / 大脳皮質 / カイニン酸 / shot-gun PCR / cloning

Research Abstract

Wistar系雄性6週齢ラットに、β-estradiol 1mg/kgを連続7日間腹腔内投与した。β-estradiol投与群および非投与群の海馬および大脳皮質よりmRNAを抽出し、各々cDNA libraryを作製、λZAPIIvectorに組み込んだあと、in vitro packagingを行い、λphageに組み込んだ。diffrential hybridizationの原理に従って、100万plaquesのphageを1st screeningし、現在2nd screening中である。このとき使用しているprobe DNAは、投与群および非投与群の各々のcDNA libraryよりshot-gunPCRで調製したものである。投与群と非投与群との間の比較はprobeの違いで選別され、非投与群のcDNAをコントロールとしているので、screeningされるのは投与群のcDNAであり、投与群のみにsignalのあるphage cloneを拾った。hybridizationの方法は、non-radioactive methodで行った。カイニン酸投与群については、各々6mg/kg、12mg/kgの濃度のカイニン酸を腹腔内に1回投与した後4日目のラットを用いて、β-estradiol投与群同様に、非投与群をコントロールとして、100万plaquesを現在、1st screening中である。

Research Products

• [Publications] A.S.Shingo: "Estrogen effects on a kainic acid-injured brain." The Japanese Journal of Pharmacology. Vol.73 Supplement I. P524 (1997)
• [Publications] 鬼頭 昭三: "Neuronにおけるnicotine-estrogen機能相関に関する研究" 平成8年度喫煙科学研究財団研究年報. 628-632 (1997)
• [Publications] A.S.Shingo: "Estrogen is as a repair system in brain by inducing IGF-1mRNA." 27th Annual Meeting Society for Neuroscience. Vol.23 No.2. 670.12 (1997)
• [Publications] S.Kito: "Nicotine and estrogen cross talk in brain in IGF-1mRNA expression." 27th Annual Meeting Society for Neuroscience. Vol.23 No.2. 670.11 (1997)
• [Publications] 新郷 明子: "脳神経系とインスリン様成長因子" 日本農芸化学会誌. Vol.72 No.2. 175-179 (1998)