1998 Fiscal Year Annual Research Report

IDDMの遺伝子療法:自家骨髄移植による基礎インスリン補償

Research Project

Project/Area Number	09877196
Research Institution	Osaka University
Principal Investigator	花房俊昭大阪大学, 医学部, 講師 (60164886)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	中島弘大阪大学, 医学部, 助手 (50252680) 宮川潤一郎大阪大学, 医学部, 助手 (00127721) 難波光義大阪大学, 医学部, 講師 (00183533)
Keywords	遺伝子治療 / 糖尿病 / インスリン / 骨髄移植 / レトロウイルス / プロインスリン / マウス
Research Abstract	昨年度、1)マウスにおいて、human proinsulinはhuman insulinに対し1/50程度のbioavailabilityを保持することを明らかにし、2)ヒト膵組織より作製したpreproinsulincDNAのconstructを挿入したretrovirus vectorを作製し、producer細胞を得た。それに引き続き、今年度は、moloney白血病ウイルス由来のレトロウイルスベクターpGK,pRxにhuman insulinおよびコントロールのconstructを挿入して作成した、合計4種類のretrovirus vectorを、lipofection法を用いてpackaging細胞にtransfectし、G418によるselectionを行って、各々約20クローンのproducer胞株を樹立した。pGk vetorはNeO耐性遺伝子を持たないため、Neo遺伝子をもったplasmid vector(pRc/CMV)をco-transfectした。 producer細胞の一部のcloneについてプロインスリン/インスリン抗体を用いた免疫染色を施行した。pGk vectorをtransfectしたproducer細胞では、挿入した配列よりimmunoreactive proinsulinが産生されることが確認された。また、培養上清のインスリン濃度をEIAL法により測定し、immunoreactive proinsulinの産生を確認した。

Research Products
(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Yoshiuchi I, et al.: "Mutation/polymorphism scanning of glucose-6-phosphatase gene promoter in non-insulin dependent diabetes mellitus patients." J. Clin. Endocrinol. Metab.83,3. 1016-1019 (1998)
[Publications] Iwahashi H, et al.: "Molecular mechanisms of pancreatic beta-cell destruction in auto-immune diabetes: Potential targets for preventive therapy." Cytokines, Cellular & Molecular Therapy. 4. 45-51 (1998)
[Publications] Yamagata K, et al.: "Mutation P291fsinsC in the transcription factor hepatocyte ; a nuclear factor-1a is dominant negative." Diabetes. 47,8. 1231-1235 (1998)
[Publications] Iwahashi.H, et al.: "Emerging therapeutic strategies in autoimmune diabetes:etiology, prediction, prevention and cure." Emarging Therapeutic Targents. in press. in press (1999)
[Publications] Yoshiuchi I, et al.: "Three new mutations in the hepatocyte nuclear factor-1a gene in Japanese subjects with deabetes mellitus." Diabetologia. in press. in press (1999)
[Publications] Imagawa A, et al.: "In situ immunological abnormalities in islets parallelled further deterioration of glycemic control in recent-onset type1 deabetes." Diabetologia. in press. in press (1999)

1998 Fiscal Year Annual Research Report

IDDMの遺伝子療法:自家骨髄移植による基礎インスリン補償

Principal Investigator

花房 俊昭 大阪大学, 医学部, 講師 (60164886)

Research Products

[Publications] Yoshiuchi I, et al.: "Mutation/polymorphism scanning of glucose-6-phosphatase gene promoter in non-insulin dependent diabetes mellitus patients." J. Clin. Endocrinol. Metab.83,3. 1016-1019 (1998)

[Publications] Iwahashi H, et al.: "Molecular mechanisms of pancreatic beta-cell destruction in auto-immune diabetes: Potential targets for preventive therapy." Cytokines, Cellular & Molecular Therapy. 4. 45-51 (1998)

[Publications] Yamagata K, et al.: "Mutation P291fsinsC in the transcription factor hepatocyte ; a nuclear factor-1a is dominant negative." Diabetes. 47,8. 1231-1235 (1998)

[Publications] Iwahashi.H, et al.: "Emerging therapeutic strategies in autoimmune diabetes:etiology, prediction, prevention and cure." Emarging Therapeutic Targents. in press. in press (1999)

[Publications] Yoshiuchi I, et al.: "Three new mutations in the hepatocyte nuclear factor-1a gene in Japanese subjects with deabetes mellitus." Diabetologia. in press. in press (1999)

[Publications] Imagawa A, et al.: "In situ immunological abnormalities in islets parallelled further deterioration of glycemic control in recent-onset type1 deabetes." Diabetologia. in press. in press (1999)

花房俊昭大阪大学, 医学部, 講師 (60164886)