新規なシスプラチン耐性遺伝子の組み換えタンパクに対するモノクローナル抗体の作製

1997 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 09877323
• Research Institution: Jikei University School of Medicine
• Principal Investigator: 横山 志郎 東京慈恵会医科大学, 医学部, 講師 (20142490)
• Keywords: シスプラチン耐性 / モノクローナル抗体

Research Abstract

全長c-DNAを制限酵素のNCOIとSmaIで切断しCoding領域を得た。これを,大腸菌発現ベクターであるPAX-5のクローニングサイトにサブクローニングを行った。
次に,このプラスミッドを大腸菌コンピーテント細胞にトランスフェクションし,1PTGによるタンパク誘導実験を行った.
その結果,目的とするlac-Zとの融合タンパクの産生はSDS-PAGEで認められなかった。原因として,本遺伝子のタンパクが大腸菌にToxicに働くためと思われた。
現在,ホスト細胞を大腸菌から酵母細胞に変え,酵母ベクターのPYEX-SIにサブクローニングを行っている。