1998 Fiscal Year Annual Research Report

ヒトPTH受容体遺伝子の導入によるヒト破骨細胞形成系の確立

Research Project

Project/Area Number	09877355
Research Institution	Showa University
Principal Investigator	須田立雄昭和大学, 歯学部, 教授 (90014034)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	自見英治郎昭和大学, 歯学部, 助手 (40276598) 宇田川信之昭和大学, 歯学部, 講師 (70245801) 新木敏正昭和大学, 歯学部, 講師 (90138420) 高橋直之昭和大学, 歯学部, 助教授 (90119222)
Keywords	破骨細胞 / 骨芽細胞 / SaOS-2 / 破骨細胞分子因子(ODF) / PTHレセプター / M-CSF / ヒト抹消血単核細胞 / 共存培養
Research Abstract	ヒト骨芽細胞SaOS-2細胞にPTH受容体遺伝子を導入したSaOS-4/3細胞を樹立し、更に本細胞を用いヒト破骨細胞形成系を確立した。 (1) 株化ヒト骨芽細胞SaOS-2にPTH受容体遺伝子を導入した細胞SaOS-4/3細胞を樹立した。親株のSaOS-2細胞をPTHで処理してもcAMPの産生亢進は殆ど起こらなかったが、SaOS-4/3細胞のcAMP産生能はPTHに反応して著しく上昇した。 (2) SaOS-4/3細胞とマウスの脾細胞の共存培養系に各種の骨吸収因子(PTH、1α,25(OH)2D3、PGE2、IL-6+可溶性IL-6受容体)を添加し、破骨細胞の形成を評価した。破骨細胞の形成はPTH添加により促進されたが、他の骨吸収因子は破骨細胞の形成を全く促進しなかった。一方、親株SaOS-2細胞とマウス脾細胞の共存培養系においては、PTHを含む各種の骨吸収因子は破骨細胞の形成を促進しなかった。 (3) ヒト末梢血単核細胞をSaOS-4/3細胞と共存培養すると、PTHに反応してヒト破骨細胞が形成された。象牙質切片上でPTHの存在下でこの共存培養を行うと切片上に多数の吸収窩が形成された。 (4) マウスの共存培養系と同様に、ヒト末梢血単核細胞とSaOS-4/3細胞の共存培養系における破骨細胞形成はGM-CSFにより強力に抑制された。また、M-CSF抗体によりマウスとヒトの破骨細胞形成は抑制された。 (5) SaOS-4/3細胞はPTH処理により破骨細胞分化因子(osteoclast differentiation factor,ODF)のmRNAの発現が誘導された。一方、親株SaOS-2細胞ではODF mRNAの発現は誘導されなかった。

Research Products
(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Suda,T.,et al.: "Modulation of osteoclast differentiation and function by osteoblasts/stromal cells." Endocrine Rev.,. in press. (1999)
[Publications] Takahashi,N.,et al.: "A new member of TNF ligand family,ODF/OPGL/TRANCE/RANKL regulates osteoclast differentiation and function." Biochem.Biophys.Res.Commun.,. in press. (1999)
[Publications] Matsuzaki,K.,et al.: "Human osteoclast-like cells are formed from peripheral blood mononuclear cells in a coculture with SaOS-2 cells transfected with the parathyroid hormone (PTH)/PTH- related protein receptor gene." Endocrinology. 140. 925-932 (1999)
[Publications] Matsuzaki,K.,et al.: "Osteoclast differentiation factor (ODF) induces osteoclast-like cell formation in human peripheral blood mononuclear cell cultures." Biochem.Biophys.Res.Commun.246. 199-204 (1998)
[Publications] Yasuda,H.,et al.: "Osteoclast differentiation factor is a ligand for osteoprotegerin/osteoclastogenesis-inhibitory factor and identical to TRANCE/RANKL." Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 95. 3597-3602 (1998)
[Publications] Nakamura,I.,et al.: "Src-dependent tyrosine phosphorylation of p130^<Cas> is required for actin ring formation in osteoclasts." J.Biol.Chem.273. 11144-11149 (1998)

1998 Fiscal Year Annual Research Report

ヒトPTH受容体遺伝子の導入によるヒト破骨細胞形成系の確立

Principal Investigator

須田 立雄 昭和大学, 歯学部, 教授 (90014034)

Research Products

[Publications] Suda,T.,et al.: "Modulation of osteoclast differentiation and function by osteoblasts/stromal cells." Endocrine Rev.,. in press. (1999)

[Publications] Takahashi,N.,et al.: "A new member of TNF ligand family,ODF/OPGL/TRANCE/RANKL regulates osteoclast differentiation and function." Biochem.Biophys.Res.Commun.,. in press. (1999)

[Publications] Matsuzaki,K.,et al.: "Human osteoclast-like cells are formed from peripheral blood mononuclear cells in a coculture with SaOS-2 cells transfected with the parathyroid hormone (PTH)/PTH- related protein receptor gene." Endocrinology. 140. 925-932 (1999)

[Publications] Matsuzaki,K.,et al.: "Osteoclast differentiation factor (ODF) induces osteoclast-like cell formation in human peripheral blood mononuclear cell cultures." Biochem.Biophys.Res.Commun.246. 199-204 (1998)

[Publications] Yasuda,H.,et al.: "Osteoclast differentiation factor is a ligand for osteoprotegerin/osteoclastogenesis-inhibitory factor and identical to TRANCE/RANKL." Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 95. 3597-3602 (1998)

[Publications] Nakamura,I.,et al.: "Src-dependent tyrosine phosphorylation of p130^<Cas> is required for actin ring formation in osteoclasts." J.Biol.Chem.273. 11144-11149 (1998)

須田立雄昭和大学, 歯学部, 教授 (90014034)