1997 Fiscal Year Annual Research Report

家族制アルツハイマー病原因遺伝子presenilin-1結合因子の探索

Research Project

Project/Area Number	09878174
Research Institution	Tohoku University
Principal Investigator	北本哲之東北大学, 医学部, 教授 (20192560)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	辛龍雲東北大学, 医学部, 講師 (40271910)
Keywords	アルツハイマー病 / プレセニリン1 / yeast two hybrid system / トランスジェニックマウス
Research Abstract	早期発症型家族性アルツハイマー病の原因遺伝子として新しく同定されたプレセニン1(PS1)の生物学的機能の解明を目的に、Yeast two hybrid systemを用いてヒト脳cDNAライブラリーよりPS1と結合する因子をスクリーニングした。PS1は、7つの疎水性膜貫通領域を有する膜蛋白で、第6(TM6)と第7番目(TM7)の膜貫通部分の間に大きな親水性酸性ドメインがループ構造をなしており、主要な機能部位を提供しているものと考えられている。そこでTM6-TM7領域をコードするcDNAを主なターゲットにPS1の結合因子を探索した。ヒト脳より抽出したmRNAを用いて、RT-PCRにてTM6-TM7領域をコードするcDNAをクローニングした。PS1cDNAをpLexAベクターに組み入れたものをターゲットして、pB42ADベクターに組み入れたヒト成人脳cDNAライブラリーをYeast two hybrid systemを用いてスクリーニングを行った。結果は有意の陽性クローンは得られなかった。この間PS1は、成熟脳よりも胎児脳でその発現が高いことが報告され、PS1の関連蛋白の検出レベルも高いことが期待される胎児脳のcDNAライブラリーを用いて再度Yeast two hybrid systemによるスクリーニングを行った。結果はまたしても有意の陽性クローンは得られなかった。そこでこのシステムに換え、ヒトPS1の高発現系トランスジェニックマウス(Tgマウス)を作製し、このTgマウス脳内で高発現PS1と結合する因子の探索に着手した。マウスプリオン遺伝子プロモーターにヒトPS1cDNAを組み込んだconstructよりTgマウスを作製し、マウス脳内でPS1蛋白の高発現を確認した。今後このヒトPS1高発現系Tgマウスを用いて、PS1と反応する機能蛋白の探索に取り組む予定である。

Research Products

(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Kawasaki K, Wakabayashi K, Kawakami A, Higuchi M, Kitamoto, T, Tsuji S, Takahashi H: "Thalamic form of Creutzfeldt-Jakob disease or fatal insomnia-report of a sporadic case withnormal prion protein genotype" Acta Neuropathol. 93. 317-322 (1997)
[Publications] Parchi P, Capellari S, Chen SG, Petersen RB, Gambetti P, Kopp N, Brown P, Kitamoto T, Tateishi J, Giese A, Kretzschmar H.: "Typing prion isoforms" Nature. 386. 232-233 (1997)
[Publications] Tanake Y, Minematsu K, Moriyasu H, Yamaguchi T, Yutani C, Kitamoto T, Furukawa H.: "A Japanese family with a variant of Gerstmann-Transsler-Scheinker disease." J.Neurol.Neurosurg.Psych. 62. 454-457 (1997)
[Publications] Shin R-W, Ogino K, Kondo A, Saido CT, Trojanowski JQ, Kitamoto T, Tateishi J: "Amyloid b-protein(Ab)1-40 but not Ab1-42 contributes to the experimental formation of Alzheimer disease amyloid fibrils in rat brain." J.Neurosci.17. 8187-8193 (1997)
[Publications] Shibuya S, Shin R-W, Higuchi J, Tateishi J, Kitamoto T.: "Codon 219 Lys allele of PRNP is not found in sporadic Creutzfeldt-Jakob disease." Ann Neurol. (in press).
[Publications] Shibuya S, Higuchi J, Shin R-W, Tateishi J, Kitamoto T.: "Protective prion protein polymorphisms against sporadic Creutzfeldt-Jakob disease." Lancet. (in press).

1997 Fiscal Year Annual Research Report

家族制アルツハイマー病原因遺伝子presenilin-1結合因子の探索

Principal Investigator

北本 哲之 東北大学, 医学部, 教授 (20192560)

Research Products

[Publications] Kawasaki K, Wakabayashi K, Kawakami A, Higuchi M, Kitamoto, T, Tsuji S, Takahashi H: "Thalamic form of Creutzfeldt-Jakob disease or fatal insomnia-report of a sporadic case withnormal prion protein genotype" Acta Neuropathol. 93. 317-322 (1997)

[Publications] Parchi P, Capellari S, Chen SG, Petersen RB, Gambetti P, Kopp N, Brown P, Kitamoto T, Tateishi J, Giese A, Kretzschmar H.: "Typing prion isoforms" Nature. 386. 232-233 (1997)

[Publications] Tanake Y, Minematsu K, Moriyasu H, Yamaguchi T, Yutani C, Kitamoto T, Furukawa H.: "A Japanese family with a variant of Gerstmann-Transsler-Scheinker disease." J.Neurol.Neurosurg.Psych. 62. 454-457 (1997)

[Publications] Shin R-W, Ogino K, Kondo A, Saido CT, Trojanowski JQ, Kitamoto T, Tateishi J: "Amyloid b-protein(Ab)1-40 but not Ab1-42 contributes to the experimental formation of Alzheimer disease amyloid fibrils in rat brain." J.Neurosci.17. 8187-8193 (1997)

[Publications] Shibuya S, Shin R-W, Higuchi J, Tateishi J, Kitamoto T.: "Codon 219 Lys allele of PRNP is not found in sporadic Creutzfeldt-Jakob disease." Ann Neurol. (in press).

[Publications] Shibuya S, Higuchi J, Shin R-W, Tateishi J, Kitamoto T.: "Protective prion protein polymorphisms against sporadic Creutzfeldt-Jakob disease." Lancet. (in press).

北本哲之東北大学, 医学部, 教授 (20192560)