• Search Research Projects
  • Search Researchers
  • How to Use
  1. Back to project page

2011 Fiscal Year Annual Research Report

心水症の予防・制圧に向けた分子生態解析

Research Project

Project/Area Number 09J04584
Research InstitutionHokkaido University

Principal Investigator

中尾 亮  北海道大学, 大学院・獣医学研究科, 特別研究員(PD)

Keywords心水症 / E. ruminantium / 遺伝子型別 / MLST法 / MLVA法 / 次世代シーケンサー / ゲノム比較解析 / ワクチン
Research Abstract

心水症はリケッチアの一種Ehrlichia ruminantiumが原因となるマダニ媒介性感染症である。本菌はin vitroの継代培養で弱毒化し、生菌ワクチンとして有効であることが報告されているが、その弱毒化機序は不明である。さらに、流行地では免疫原性の異なる株の混在が示唆されており、効果的なワクチン処方には野外株の遺伝子型別が必須である。そこで、本研究では次世代シーケンサーを中心としたゲノム解析技術によりワクチン株の弱毒化機序の解明と野外流行株の系統解析を目的に研究を進めた。
ヤギに強毒性を示す野外分離株であるGardel株と、それを親株として得られた弱毒Gardel株を材料に、次世代シーケンサーを用いた全ゲノム配列の解読を行った。2株間のゲノム比較により、合計16箇所のゲノム差異が弱毒化に関連しうるゲノム変化として検出された。今後、発現遺伝子ならびに翻訳蛋白質の解析により、宿主への病原性を担う遺伝子の特定が可能となり、遺伝子ノックアウト技術を応用することで様々な野外流行株に対するワクチンの開発につながることが期待できる。
アフリカのほぼ全域に由来する実験室分離株とウガンダの心水症流行地で採集されたエーリキア感染マダニを対象に、複数のハウスキーピング遺伝子の塩基配列に基づくMLST法により解析を行った。その結果、同一地域において地理的拘束をこえた様々な遺伝子型の混在が示された。また、複数の株間での大規模な遺伝子組換えが検出され、本菌の重要なゲノム改編メカニズムであることを明らかにした。また、より簡便・迅速な解析手法としてゲノム全域に点在する繰り返し配列をマーカーとするMLVA法を新たに開発した。既存の型別法であるPCR-RFLP法より高い多型識別能力が確認され、流行地における優勢遺伝子型群の特定が可能であり、ワクチン株を選定する上で有用な遺伝子型別法であることが示された。さらに今後、野外ワクチネーション試験において遺伝子型とワクチン効果等の臨床像の相関性を解析することで、本菌の病原性を規定する遺伝的背景の解明に活用されることが期待される。

  • Research Products

    (18 results)

All 2012 2011

All Journal Article (6 results) (of which Peer Reviewed: 6 results) Presentation (12 results)

  • [Journal Article] A pilot study on developing a mucosal vaccine against alveolar echinococcosis (AE) using recombinant tetraspanin 3 : vaccine efficacy and immunology2012

    • Author(s)
      Dang Z, Yagi K, Oku Y, Kouguchi H, Kajino K, Matsumoto J, Nakao R, Wakaguri H, Toyoda A, Yin H, Sugimoto C
    • Journal Title

      PLoS Neglected Tropical Diseases

      Volume: 6 Pages: e1570

    • DOI

      10.1371/journal.pntd.0001570

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Zoophilic feeding behaviour of phlebotomine sand flies in the endemic areas of cutaneous leishmaniasis of Sindh Province, Pakistan2012

    • Author(s)
      Tiwananthagorn S, Bhutto AM, Baloch JH, Soomro FR, Kawamura Y, Nakao R, Aoshima K, Nonaka N, Oku Y, Katakura K
    • Journal Title

      Parasitology Research

      Volume: (印刷中)

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Development of multiple-locus variable-number tandem-repeat analysis for rapid genotyping of Ehrlichia ruminantium and its application to infected Amblyomma variegatum collected in heartwater endemic areas in Uganda2012

    • Author(s)
      Nakao R, Morrison LJ, Zhou L, Magona JW, Jongejan F, Sugimoto C
    • Journal Title

      Parasitology

      Volume: 139 Pages: 69-82

    • DOI

      10.1017/S003118201100165X

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Identification of genetic loci affecting the establishment and development of Echinococcus multilocularis larva in mice2011

    • Author(s)
      Nakao R, Kameda Y, Kouguchi H, Matsumoto J, Dang Z, Simon AY, Torigoe D, Sasaki N, Oku Y, Sugimoto C, Agui T, Yagi K
    • Journal Title

      International Journal for Parasitology

      Volume: 41 Pages: 1121-1128

    • DOI

      10.1016/j.ijpara.2011.06.007

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Multi-locus sequence typing of Ehrlichia ruminantium strains from geographically diverse origins and collected in Amblyomma variegatum from Uganda2011

    • Author(s)
      Nakao R, Magona JW, Zhou L, Jongejan F, Sugimoto C
    • Journal Title

      Parasites & Vectors

      Volume: 4 Pages: 137

    • DOI

      10.1186/1756-3305-4-137

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] An outbreak of bovine trypanosomiasis in the Blue Nile State, Sudan2011

    • Author(s)
      Salim B, Bakheit MA, Salih SE, Kamau J, Nakamura I, Nakao R, Sugimoto C
    • Journal Title

      Parasites & Vectors

      Volume: 4 Pages: 74

    • DOI

      10.1186/1756-3305-4-74

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] 紅斑熱群リケッチアの迅速種鑑別法の開発2012

    • Author(s)
      中尾亮
    • Organizer
      第153回日本獣医学会学術集会
    • Place of Presentation
      大宮ソニックシティ(さいたま市)
    • Year and Date
      2012-03-29
  • [Presentation] メタゲノム解析によるマダニ保有微生物叢の検索2012

    • Author(s)
      中尾亮
    • Organizer
      第153回日本獣医学会学術集会
    • Place of Presentation
      大宮ソニックシティ(さいたま市)
    • Year and Date
      2012-03-27
  • [Presentation] 心水症に対する効果的予防戦略確立に向けたEhrlichia ruminantiumの分子遺伝学的研究2012

    • Author(s)
      中尾亮
    • Organizer
      第153回日本獣医学会学術集会
    • Place of Presentation
      大宮ソニックシティ(さいたま市)
    • Year and Date
      2012-03-27
  • [Presentation] マダニ保有微生物叢の解明へ向けたメタゲノム解析技術の応用2012

    • Author(s)
      中尾亮
    • Organizer
      第81回日本寄生虫学会大会
    • Place of Presentation
      兵庫医科大学西宮キャンパス(西宮市)
    • Year and Date
      2012-03-24
  • [Presentation] BLSOM法による生物系統推定のマダニメタゲノム解析への応用2012

    • Author(s)
      中尾亮
    • Organizer
      第18回リケッチア研究会
    • Place of Presentation
      大阪クリスタルタワー(大阪市)
    • Year and Date
      2012-02-12
  • [Presentation] メタゲノム解析によるマダニ保有微生物叢の検索2012

    • Author(s)
      中尾亮
    • Organizer
      感染症若手フォーラム
    • Place of Presentation
      「やすらぎ伊王島」海の見えるホテル(長崎市)
    • Year and Date
      2012-02-03
  • [Presentation] エキノコックス症モデルマウスを用いた虫体発育に対する宿主抵抗性の解析2011

    • Author(s)
      中尾亮
    • Organizer
      第71回日本寄生虫学会東日本支部会
    • Place of Presentation
      杏林大学三鷹キャンパス(三鷹市)
    • Year and Date
      2011-10-01
  • [Presentation] Genotying of Ehrlichia ruminantium by multiple-locus variable-number tandem-repeat analysis2011

    • Author(s)
      中尾亮
    • Organizer
      The 3rd International Young Researcher Seminar in Zoonosis Control 2011
    • Place of Presentation
      北海道大学(札幌市)
    • Year and Date
      2011-09-16
  • [Presentation] Multiple-Locus Variable-Number Tandem-Repeat Analysis for molecular typing and phylogenetic analysis of Ehrlichia ruminantium2011

    • Author(s)
      中尾亮
    • Organizer
      XIII International Congress of Bacteriology and Applied Microbiology
    • Place of Presentation
      札幌コンベンションセンター(札幌市)
    • Year and Date
      2011-09-06
  • [Presentation] Multiple-locus variable-number tandem-repeat analysis of Ehrlichia ruminantium in Amblyomma variegatum collected at heartwater endemic areas in Uganda2011

    • Author(s)
      中尾亮
    • Organizer
      7th International Conference on Ticks and Tick-borne Pathogens (TTP-7)
    • Place of Presentation
      City Auditorium (Zaragoza, Spain)
    • Year and Date
      2011-09-01
  • [Presentation] Identification and characterization of variable-number tandem-repeat (VNTR) markers in Ehrlichia ruminantium2011

    • Author(s)
      中尾亮
    • Organizer
      6th International Meeting on Rickettsiae and Rickettsial Diseases
    • Place of Presentation
      Candia Maris Hotel (Heraklion, Greece)
    • Year and Date
      2011-06-06
  • [Presentation] Development of multiple-locus variable-number tandem-repeat analysis (MLVA) of Ehrlichia ruminantium and its application to field isolates in Amblyomma variegatum2011

    • Author(s)
      中尾亮
    • Organizer
      6th International Meeting on Rickettsiae and Rickettsial Diseases
    • Place of Presentation
      Candia Maris Hotel (Heraklion, Greece)
    • Year and Date
      2011-06-06

URL: 

Published: 2013-06-26  

Information User Guide FAQ News Terms of Use Attribution of KAKENHI

Powered by NII kakenhi