1998 Fiscal Year Annual Research Report
超低分子量4ヘムタンパク質の構造と機能-重金属還元による環境修復の分子機構-
Project/Area Number |
10044072
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Research Category |
Grant-in-Aid for international Scientific Research
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Section | Joint Research . |
Research Institution | Yokohama National University |
Principal Investigator |
阿久津 秀雄 横浜国立大学, 工学部, 教授 (60029965)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
小澤 潔 横浜国立大学, 工学部, 助手 (20251770)
藤原 敏道 横浜国立大学, 工学部, 助教授 (20242381)
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Keywords | CgbC_3 / チヘムタンパク質 / 大量発現系 / 酸化還元電位 / NMR / 電子移動 / 電子伝達タンパク質 / シトクロム |
Research Abstract |
Nealson教授が6月に訪日の予定であったが、緊急の会議のため訪日を中止したので電子メールを使い研究計画を立てた。これに基づき、小澤潔助手が7月25日から8月28までカリフォルニア工科大学のNealson教授の研究室を訪れ、Shewanella putrifaciensを宿主とした硫酸還元菌のチトクロムc_3の発現に関する実験を行った。これがみごとに成功し、世界で初めてヘテロな宿主を用いたc型チトクロムの大量発現系を確立することができた。この結果は今まで発現が困難とされてきた多くのc型チトクロムの研究に大きなインパクトを与えるものである。小澤助手はパサデナで精製したS.putrifaciensのチトクロムc_3を日本に持ち帰り、当研究室において酸化還元電位の解析を行った。電気化学的にはなかなか安定したデータが得られなかったので、条件をいろいろ変えて検討した。本研究代表者阿久津は11月始めにNealson教授を訪ね、この問題を検討した。さらに、専門家の意見を求めるためにアリゾナ大学のCusanovich教授を訪ねて討論を行った。帰国後、これらの議論を踏まえて実験を行ったところ再現性のある結果が得られるようになった。これらのデータを携えて、3月3日から7日まで藤原敏道助教授がパサデナを訪れて、討論を行った。微視的酸化還元電位のNMRによる解析も並行して進めている。
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Research Products
(7 results)
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[Publications] S.Kim: "The interactlons of forric and ferrous cytochrome c with cardiolipin in phosphollpid membrancs studled by solid-state ^2H and ^<31>P NMR." J.Mol.Struct.441. 183-188 (1998)
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[Publications] T.Odahara: "Membrane dynamica in the intact PM2 phage and its host colls as monitored by T_1p(H)." Biochim.Biophys.Acta. 1369. 240-246 (1998)
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[Publications] T.Ishida: "A primitlve pathway of porphyrin biosynthesis and enzymology in Desulfovibrlo vulgarls." Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 95. 4853-4858 (1998)
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[Publications] T.Ohmura: "Paramagnetic Inversion of the sign of the interference contrlbutlon to the transvarse relaxation of the imido Protons of the eoordinated imldazoles in the uniformly ^<13>N labeled cytochrome c_3" J.Magn.Reson.131. 367-372 (1998)
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[Publications] T.Fujiwara: "Multidimensional solid-state NMR for determining dihedral angle from the correlation of ^<13>C-^1H and ^<13>C-^<13>C dipolar.interactions under magic-angle spinning conditions." J.Chem.Phys.109. 2380-2393 (1998)
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[Publications] T.Ohmura: "Ionie-strength dependent physlcochemical factors in cytochrome c_3 regulating the electron transfer rata." Biophys.J.75. 1483-1490 (1998)
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[Publications] 阿久津秀雄: "構造生物学とその解析法(分担)" 共立出版株式会社, 14 (1997)