2000 Fiscal Year Annual Research Report
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10044213
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| Research Institution | Tokyo Metropolitan University |
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Principal Investigator |
駒野 照弥 東京都立大学, 理学研究科, 教授 (00087131)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
古屋 伸久 東京都立大学, 理学研究科, 助手 (50244413)
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| Keywords | ミキソバクテリア / 形態形成 / 胞子形成 / fruA遺伝子 / fruB遺伝子 |
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| Research Abstract |
ミキソバクテリアはグラム陰性細菌でありながら、真核生物である細胞性粘菌と類似の形態形成を行う。栄養増殖期には一般の細菌と同様に、二分裂の形で増殖するが、栄養を制限した寒天培地では、形態形成過程にはいる。細胞はグライディングにより集合し、マウンドを形成する。個々の細胞は胞子に変換し、成熟胞子よりなるマウンドは子実体と呼ばれる。Myxococcus xanthusは、形態形成過程で細胞間の情報交換が頻繁に起り、細菌で形態形成を解析できるユニークな系である。fruA遺伝子は形態形成の初期に必須な分子質量25 kDaの推定転写因子をコードする。本年度は、fruA遺伝子の発現制御に関する解析を行い、fruAプロモーター近傍に結合する抑制因子Xの存在をゲルシフト法で推定し、その認識配列を推定した。またfruA変異株で発現の著しく抑えられるタンパクP15の構造を質量分析法で解析した。fruB遺伝子の上流に存在するORF134に変異を導入し、ORF134欠損では形態形成が著しく遅れることを明らかにした。ORF134-fruBはオペロンとしてともに形態形成に関与する。このオペロンは2個のプロモーターを持ち、栄養増殖期は1個だけが発現しているが、形態形成時には2個とも発現する。井上は、lonDは熱誘導遺伝子であり、その発現には大腸菌rpoHホモログであるSigBCEには依存せず、rpoDホモログであるSigAと転写因子であるHsfAに依存することを明らかにした。HsfAは二成分制御系のレシーバードメインをもち、HsfBキナーゼによりリン酸化を受ける。リン酸化HsfAはlonDプロモーター上流に結合し、転写を活性化する。またTwo hybrid法でPknタンパクキナーゼ群と相互作用する遺伝子を検索した。
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Research Products
(6 results)
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[Publications] Komano et al.: "The transfer region of lncl1 plasmia R64 : similarities between R64 tra and Leqionella icm/dot genes."Molecular Microbiology. 35. 1348-1359 (2000)
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[Publications] Furuya and Komano: "Initiation and termination of DNA transfer during conjugation of lncl1 plasmid R64 : the role of two sets of inverted repeat sequences."Journal of Bacteriology. 182. 3191-3196 (2000)
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[Publications] Gyohda and Komano: "Purification and charactenzation of the R64 shuffion-specific recombinase."Journal of Bacteriology. 182. 2782-2792 (2000)
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[Publications] Inouye et al.: "A large family of eukaryotic-like protein Ser/Thr kinases of Myxococcus xanthus, a developmental bacterium."Microbial & Comparative Genomics. 5. 103-120 (2000)
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[Publications] Udo et al.: "Identification of a substrate for Pkn2, a protein Ser/Thr kinase from Myxococcus xanthus by a novel method for substrate identification"J.Mol.Microbiol.Biotechnol.. 2. 557-563 (2000)
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[Publications] Ueki and Inouye: "SigB, SigC, and SigE from Myxococcus xanthus homologous to sigma-32 are not required for heat shock response."J.Mol.Microbiol.Biotechnol.. 3(in press). (2001)
