1999 Fiscal Year Annual Research Report

コレステロール生合成酵素系と先天異常

Research Project

Project/Area Number	10044251
Research Institution	Niigata University
Principal Investigator	小野輝夫新潟大学, 医学部, 教授 (00000927)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	渡部通寿新潟大学, 医学部, 助手 (40303127) 榊原順新潟大学, 医学部, 助手 (90242403)
Keywords	スクアレンエポキシダーゼ(SE) / Langer-Giedeon症候群 / 転写調節 / ステロールレギュレトリーエレメント(SRE) / SE機能ドメイン / 核内レセプター / オキシステロール
Research Abstract	コレステロール生合成の後段階酵素の1つスクアレン・工ポキシダーゼの遺伝子をクローニングし、ヒト遺伝子が第8染色体のテロメア近傍8q24.1に局在することを明らかにした。この部位はヒトの先天奇形で知られるLanger-Giedeon症候群の原因遺伝子が推定されている部位と一致する。本症候群患者の遺伝子解析では未だスクアレン・エポキシダーゼが関わると同定された症例はなく現在も探索は進行中である。将来の遺伝子異常解析に備えるため、スクアレン・エポキシダーゼ酵素活性測定スクリーニングの簡便化、Biosensor開発の検討、遺伝子プロモーター領域の全塩基配列決定、転写開始点(ネズミ)、ステロール応答領域の機能解析を行い、プロモーター領域ではSterol Regulatory Element(SRE)並びにNF-Y相同部位の存在を明らかにした。ノックアウトマウス以外に酵素欠損動物を作成する手段として、本酵素に対する阻害剤のスクリーニングを行い、緑茶から有効な阻害剤を見出した他、FAD、基質、阻害剤結合部位を推定した。ヒト本酵素の膜貫通部位は 5個あることがPred.IIプログラムによるコンピュータ解析から推定さ、れ、生物種による相違を明らかにできた。スクアレン・エポキシダーゼ遺伝子異常は転写に関わるプロモーター領域の配列異常に基づく転写機能異常、遺伝子産物であるタンパク質のアミノ酸異常によるもの、酵素の代謝回転異常などの関与が想定されるが、解析のための基盤は整った。転写機構に関し胆汁酸をリガンドとするFXRの機能解析、オキシステロールをリガンドとするLXRsのスクアレン・エポキシダーゼ遺伝子のDown-regulationへの関与を明らかにした。

Research Products
(9 results)

All Other

All Publications (9 results)

[Publications] Nagai, M.: "Localization of the squalene epoxidase gene (SQLE) to human chromosome 8q24.1"Genomics. 44. 141-143 (1997)
[Publications] Grieveson, L.A.: "A simplified squalene epoxidase assay based on an HPLC separation and time dependent UV/Visible determination of squalene"Anal. Biochem.. 252. 19-23 (1997)
[Publications] 永井雅昭: "ヒトスクアレンエポキシダーゼ遺伝子の染色体マッピングとプロモーター解析"脂質生化学研究(JBCL). 39. 303-306 (1997)
[Publications] 小野輝夫: "スクアレン・エポキシダゼの機能ドメインの解析-I"脂質生化学研究(JBCL). 40. 81-84 (1998)
[Publications] Kanda, T.: "Regulation of the expression of human intestinal bile acid-binding protein in Caco-2 cells"Biochem. J.. 41. 297-299 (1999)
[Publications] 小野輝夫: "核内レセプターLXRのスクアレン・エポキシダーゼ遺伝子制御への関与"脂質生化学研究(JBCL). 39. 303-306 (1997)
[Publications] Grober, J.: "Identification of a bile acid-responsive element in the human ileal bile acid binding prote gene. Involvement of the farnesoid X-receptor/9-cis-retinoic acid receptor heterodimer"J. Biol. Chem.. 274. 29749-29754 (1999)
[Publications] Abe, I.: "Green tea polyphenols: Novel and potent inhibitors of squalene epoxidase"Biochem. Biophys. Res. Commun.. (in press). (2000)
[Publications] Lee, H.K.: "Photoaffinity labeling and site-directed mutagenesis of rat squalene epoxidase"Arch. Biochem. Biophys.. (in press). (2000)

1999 Fiscal Year Annual Research Report

コレステロール生合成酵素系と先天異常

Principal Investigator

小野 輝夫 新潟大学, 医学部, 教授 (00000927)

Research Products

[Publications] Nagai, M.: "Localization of the squalene epoxidase gene (SQLE) to human chromosome 8q24.1"Genomics. 44. 141-143 (1997)

[Publications] Grieveson, L.A.: "A simplified squalene epoxidase assay based on an HPLC separation and time dependent UV/Visible determination of squalene"Anal. Biochem.. 252. 19-23 (1997)

[Publications] 永井雅昭: "ヒトスクアレンエポキシダーゼ遺伝子の染色体マッピングとプロモーター解析"脂質生化学研究(JBCL). 39. 303-306 (1997)

[Publications] 小野輝夫: "スクアレン・エポキシダゼの機能ドメインの解析-I"脂質生化学研究(JBCL). 40. 81-84 (1998)

[Publications] Kanda, T.: "Regulation of the expression of human intestinal bile acid-binding protein in Caco-2 cells"Biochem. J.. 41. 297-299 (1999)

[Publications] 小野輝夫: "核内レセプターLXRのスクアレン・エポキシダーゼ遺伝子制御への関与"脂質生化学研究(JBCL). 39. 303-306 (1997)

[Publications] Grober, J.: "Identification of a bile acid-responsive element in the human ileal bile acid binding prote gene. Involvement of the farnesoid X-receptor/9-cis-retinoic acid receptor heterodimer"J. Biol. Chem.. 274. 29749-29754 (1999)

[Publications] Abe, I.: "Green tea polyphenols: Novel and potent inhibitors of squalene epoxidase"Biochem. Biophys. Res. Commun.. (in press). (2000)

[Publications] Lee, H.K.: "Photoaffinity labeling and site-directed mutagenesis of rat squalene epoxidase"Arch. Biochem. Biophys.. (in press). (2000)

小野輝夫新潟大学, 医学部, 教授 (00000927)