1998 Fiscal Year Annual Research Report

ニワトリBリンパ細胞株の相同DNA組換え機構の解析

Research Project

Project/Area Number	10044274
Research Category	Grant-in-Aid for international Scientific Research
Section	Joint Research .
Research Institution	Kyoto University
Principal Investigator	武田俊一京都大学, 医学研究科, 教授 (60188191)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	HOEIJMAKAS J ロッテルダムエラスムス大学, 医学部, 教授 THOMAS Lawre ローレンスリブモア国立研究所, カリフォルニア大学・サンフランシスコ校, グループリーダー客員高田穣京都大学, 医学研究科, 助手 (30281728) 岩井裕子京都大学, 医学研究科, 助手 (10281726) 園田英一朗科学技術振興実業団, 研究員 (50281093)
Keywords	相同DNA組み換え / 標的組み換え / ターゲットインテグレーション / 遺伝子ノックアウト / DNA修復 / 電離放射線 / Rad51 / Ku
Research Abstract	高等真核細胞(ヒト、植物など)にゲノムDNAを含むDNAコンストラクトを導入するとインテグレーションはランダムに起る。このルールの唯一の例外として、ニワトリBリンパ細胞株、DT40ではターゲットインテグレーション(標的組み換え)がランダムインテグレーションと同じ効率で起こる。標的組み換えは、導入したDNAコンストラクトがそれと相同な塩基配列を持った染色体DNAとの間で相同組み換えすることによって起る。我々は、相同DNA組み換え機構の解析を、DT40から標的組み換えで相同DNA組み換えのミュータントを作成することによって行っている。これまでに以下の実験結果を得た。 (1) 高等真核細胞でも相同組み換えが電離放射線照射によって生じたゲノム2本鎖切断(DSB)の修復に関与することを証明した。 (2) 我々は、大腸菌のRecAホモログである、RAD51遺伝子のコンディショナルミュータントを作成した。そして、RAD51遺伝子の発現停止後の最初の分裂サイクルの時に染色体断裂を起して、Rad51欠損細胞が死ぬことを見い出した)。この所見は、高等真核細胞はDNA複製中に少数(数個のオーダー)のDSBを起し、相同組み換えがそれを修復していることを示唆する。

Research Products

(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] E.Sonoda et al.: "Rad51 deficient versebrate cells accumulate chromosomal breaks prior to cell death." EMBO J.vol.17. 598-608 (1998)
[Publications] M.Tanabe et al.: "Disruption of the HSF3 gene results in the severe reduction of heat shock gene expression and loss of thermotolerance." EMBO J.vol.17. 1750-1758 (1998)
[Publications] Y.Yamaguchi-Iwai et al.: "Involvement of Rad52 in genetic recombination and double -strand break repair of vertebrate cells." Mol.Cell Biol.vol.18. 6430-6435 (1998)
[Publications] Y.Kuroiwa et al.: "Efficient modification of a human chromosome by telomer-directed truncation in high homologous recombination-proficient chicken DT40cells." Nucl.Acid Res.vol.26. 3447-3448 (1998)
[Publications] M.Takata et al.: "Homologous recombination and nonhomologous end joining pathways of DNA double-strand break repair have over lappingrdes in the maintenance of chromo-somal integrity inverte-brate Cells." EMBO J.vol.17. 5497-5508 (1998)
[Publications] E.Sonoda et al.: "Sister chromatid exchanges are mediated by homologous recombination in vertebrate cells." Mol.Cell.Biol.(in press).

1998 Fiscal Year Annual Research Report

ニワトリBリンパ細胞株の相同DNA組換え機構の解析

Principal Investigator

武田 俊一 京都大学, 医学研究科, 教授 (60188191)

Research Products

[Publications] E.Sonoda et al.: "Rad51 deficient versebrate cells accumulate chromosomal breaks prior to cell death." EMBO J.vol.17. 598-608 (1998)

[Publications] M.Tanabe et al.: "Disruption of the HSF3 gene results in the severe reduction of heat shock gene expression and loss of thermotolerance." EMBO J.vol.17. 1750-1758 (1998)

[Publications] Y.Yamaguchi-Iwai et al.: "Involvement of Rad52 in genetic recombination and double -strand break repair of vertebrate cells." Mol.Cell Biol.vol.18. 6430-6435 (1998)

[Publications] Y.Kuroiwa et al.: "Efficient modification of a human chromosome by telomer-directed truncation in high homologous recombination-proficient chicken DT40cells." Nucl.Acid Res.vol.26. 3447-3448 (1998)

[Publications] M.Takata et al.: "Homologous recombination and nonhomologous end joining pathways of DNA double-strand break repair have over lappingrdes in the maintenance of chromo-somal integrity inverte-brate Cells." EMBO J.vol.17. 5497-5508 (1998)

[Publications] E.Sonoda et al.: "Sister chromatid exchanges are mediated by homologous recombination in vertebrate cells." Mol.Cell.Biol.(in press).

武田俊一京都大学, 医学研究科, 教授 (60188191)