1999 Fiscal Year Annual Research Report
カルシウム/カルモデュリン依存性多能性プロテインキナーゼを介するシグナル伝達
Project/Area Number |
10102002
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Research Institution | Asahikawa Medical College |
Principal Investigator |
藤澤 仁 旭川医科大学, 医学部, 教授 (10027039)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
竹内 昌之 旭川医科大学, 医学部, 助手 (40226999)
石田 敦彦 旭川医科大学, 医学部, 助手 (90212886)
亀下 勇 旭川医科大学, 医学部, 助教授 (60127941)
木谷 隆子 旭川医科大学, 医学部, 教務職員 (70101417)
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Keywords | カルシウムイオン / カルモデュリン / シグナル伝達 / 蛋白質リン酸化酵素 / 蛋白質脱リン酸化酵素 / CaMキナーゼカスケード / CaMキナーゼホスファターゼ / CaMキナーゼII |
Research Abstract |
1.CaMキナーゼ、CaMキナーゼホスファターゼの活性制御機構 CaMキナーゼIIは自己リン酸化されると活性化され、CaMキナーゼIVとCaMキナーゼIはCaMキナーゼカスケードの上流のCaMキナーゼキナーゼによってリン酸化されると活性化されるが、活性化されたCaMキナーゼII、IV、IはいずれもCaMキナーゼホスファターゼによって脱燐酸化されて脱活性化され元の状態に復する。このリン酸化と脱リン酸化による活性制御機構で重要な働きをしているCaMキナーゼホスファターゼの活性制御機構について検討した結果CaMキナーゼホスファターゼの基質の一つであるCaMキナーゼIIによってリン酸化され、活性化されることが明らかになった。CaMキナーゼとCaMキナーゼホスファターゼが相互に活性を制御している機構の存在が推定され興味深い。 2.CaMキナーゼホスファターゼのcDNAクローニングと発現 ラットのCaMキナーゼホスファターゼをcDNAクローニングして一次構造を明らかにし、リコンビナント酵素の発現および酵素の特異抗体を調整した。これを用いてCaMキナーゼホスファターゼの組織分布、細胞内分布を調べ中枢および末梢の各組織に広く分布していること、細胞質に存在することを明らかにした。さらに免疫組織化学的に脳内分布を調べ、CaMキナーゼII、IV、Iの分布と比較してCaMキナーゼカスケードにおける役割を考察した。
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[Publications] T.Kitani: "Molecular Cloning of Ca^<2+>/Calmodulin-Dependent Protein Kinase Phosphatase"J. Biochem.. 125. 1022-1028 (1999)
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[Publications] Y.Tatsu: "Synthesis of caged peptides using caged lysine : Application to the synthesis of caged AIP, a highly specific inhibitor of calmodulin-dependent protein kinase II"Bioorg. Med. Chem. Lett.. 9. 1093-1096 (1999)
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[Publications] I.Kameshita: "Phosphorylation and activation of Ca^<2+>/calmodulin-dependent protein kinase phosphatase by Ca^<2+>/calmodulin-dependent protein kinase II"FEBS Lett.. 456. 249-252 (1999)
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[Publications] Y.Masuya: "MAP Kinase-independent Induction of Proto-oncogene c-fos mRNA by Hemin in Human Cells"Biochem. Biophys. Res. Commun.. 260. 289-295 (1999)
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[Publications] I.Kameshita: "Detection of a Variety of Ser/Thr Protein Kinases using a Synthetic Peptide with Multiple Phosphorylation Sites"J. Biochem.. 126. 991-995 (1999)
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[Publications] Y.Nakamura: "Immunohistochemical study of the distribution of Ca^<2+>/calmodulin-dependent protein kinase phosphatase in the rat central nervous system"Mol. Brain Res.. (in press).