2001 Fiscal Year Annual Research Report
カルシウム/カルモデュリン依存性多機能性プロテインキナーゼを介するシグナル伝達
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10102002
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| Research Institution | Asahikawa Medical College |
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Principal Investigator |
藤澤 仁 旭川医科大学, 医学部, 教授 (10027039)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
竹内 昌之 旭川医科大学, 医学部, 助手 (40226999)
石田 敦彦 旭川医科大学, 医学部, 助手 (90212886)
加藤 剛志 旭川医科大学, 医学部, 助教授 (60194833)
木谷 隆子 旭川医科大学, 医学部, 教務職員 (70101417)
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| Keywords | カルシウムイオン / カルモデュリン / CaMキナーゼカスケード / CaMキナーゼII / CaMキナーゼキナーゼ / Aキナーゼ / CaMキナーゼホスファターゼ / CaMキナーゼホスファターゼN |
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| Research Abstract |
1.CaMキナーゼホスファターゼの活性制御機構
CaMキナーゼI、II、IVを特異的に脱リン酸化して脱活性化するCaMキナーゼホスファターゼのポリカチオンによる活性化を調べ、ポリカチオンを介したCaMキナーゼ、CaMキナ-ゼホスファターゼの複合体形成が関与している可能性を示した。
2.CaMキナーゼホスファターゼNの研究
核に局在する新しい酵素CaMキナーゼホスファターゼNをcDNAクローニングしてリコンビナント酵素、及び特異抗体を調製した。抗体を用いて組織分布,細胞内分布を調べ、神経細胞の核に特異的に分布する酵素である事を明らかにした。さらに種々の変異酵素を作成して、本酵素の核内局在化機構を解析した。
3.CaMキナーゼIIの生理作用
CaMキナーゼIIとカルシウム/カルモデュリンとの親和性が自己リン酸化により著明に変動し、他のCaMキナーゼの挙動とは大きく異なる事を明らかにし、カルシウム/カルモデュリンによるシグナル伝達系でのCaMキナーゼII制御の機構を考察した。
4.CaMキナーゼカスケードとAキナーゼによるシグナル伝達のクロストーク
CaMキナーゼカスケードの上流酵素であるCaMキナーゼキナーゼがAキナーゼでリン酸化されて活性が変動することを見出し、Aキナーゼによるリン酸化部位を特定し、それらの部位変異酵素を作成して活性化、不活性化の機構を考察した。
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[Publications] Y.Nakamura: "Immunohistochemical localization of Ca^<2+>/calmodulin-dependent protein kinase kinase β in the rat central nervous system"Neurosci.Res.. 39. 175-188 (2001)
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[Publications] H.Fujisawa: "Regulation of the Activities of Multifunctional Ca^<2+>/Calmodulin-Dependent Protein Kinases"J.Biochem.. 129. 193-199 (2001)
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[Publications] A.Ishida: "Substrate Specificity of Ca^<2+>/Calmodulin-dependent Protein Kinase Phosphatase : Kinetic Studies Using Synthetic Phosphopeptides as Model Substrates"J.Biochem.. 129. 745-753 (2001)
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[Publications] S.Okuno: "Regulation of Ca^<2+>/Calmodulin-Dependent Protein Kinase Kinase α by cAMP-Dependent Protein Kinase I. BIOCHEMICAL ANALYSIS"J.Biochem.. 130. 503-513 (2001)
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[Publications] T.Kitani: "Regulation of Ca^<2+>/Calmodulin-Dependent Protein Kinase Kinase α by cAMP-Dependent Protein Kinase II. MUTATIONAL ANALYSIS"J.Biochem.. 130. 515-525 (2001)
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[Publications] M.Takeuchi: "Identification and Characterization of CaMKP-N, Nuclear Calmodulin-Dependent Protein Kinase Phosphatase"J.Biochem.. 130. 833-840 (2001)
