1998 Fiscal Year Annual Research Report
プロテインキナーゼCサブタイプの活性化とターゲッティング機構の関連に関する研究
| Project/Area Number |
10169243
|
|---|
| Research Institution | Kobe University |
|---|
Principal Investigator |
斎藤 尚亮 神戸大学, バイオシグナル研究センター, 教授 (60178499)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
白井 康仁 神戸大学, バイオシグナル研究センター, 助手 (60263399)
|
|---|
| Keywords | プロテインキナーゼC / トランスロケーション / サブタイプ / GFP / ホルボールエステル / ATP受容体 |
|---|
| Research Abstract |
プロテインキナーゼC(PKC)のtranslocation(ターゲッティング)機構を解析することにより、PKC各分子種の生理的な役割について解析した。我々はGFP(Green fluorescent protein)とラット各PKC分子種(γ-,.ε-,δ-PKC)の融合蛋白質を各種培養細胞に発現させ、細胞外刺激により活性化された生細胞内のPKCの細胞内の動態の観察を行った。その結果、
1)γ-,δ-,ε-PKCすべでが、G蛋白質共役型ATP受容体刺激により、20sec以内に細胞膜にtranslocationし、3min以内に元の状態に戻る(Retranslocation)。しかし、ホルボールエステル刺激によっては、すべての分子種が比較的ゆっりくりと(3-5min)ranslocationし、そのまま膜にとどまる。つまり、同一の分子種であっても、刺激により異なるターゲッティング機構を持つことが示された。
2)アラキドン酸刺激により、γ-PKCは素早く細胞膜に、ε-PKCはややゆっくりとGolgi体周辺にtranslocationするのに対して、δ-PKCはtranslocationしない。つまり、同一の刺激によっても分子種によってtargeting部位(translocation)は異なることが示された。
3)δ-PKCを活性化する3種の刺激(ATP,TPA,H202)は、それぞれ異なるターゲッティング機構によるものであり、細胞の機能に対する調節機構も異なると推測される。以上の結果から、PKCのターゲッティング機構は、分子種特異的、刺激特異的でありしかも時間的、空間的にも異なっていることが示され、ターゲッティング機構の解析はPKC分子種独自の機能の解明に有力な方法と考えられた。
|
-
[Publications] Hashimoto,T.他: "Isoform-specific redistribution of calcineurin Aα and Aβ in hippocampal CA1 regions of Gerbil after transient ischemia." J.Neurochem.70. 1289-1298 (1998)
-
[Publications] Morikawa,O.他: "Effects of interferon-α and-γ on the transcriptional regulation of serotonin transporter." Eur.J.Pharmacol.349. 317-324 (1998)
-
[Publications] Ohmori,S.他: "Three distinct mechanisms for translocation and activation of δ-subspecies of protein kinase C." Mol.Cell.Biol.18. 5263-5271 (1998)
-
[Publications] Shirai,Y.他: "Distinct effects of fatty acids on translocation of γ-and ε-protein kinase C." J.Cell.Biol.143. 511-521 (1998)
-
[Publications] Shirai,Y.他: "Subspecies specific targeting mechanism of protein kinase C." Jpn.J.Pharmacology.78. 411-417 (1998)
-
[Publications] Yamamoto,H.,他: "Immunohistochemical localization of serotonin transporter in normal and colchicine treated rat brain." Neurosci.Res.32. 305-312 (1998)
-
[Publications] Nakai,M.他: "Amyloid beta Protein (25-35) Phosphorylates MARCKS through Tyrosine Kinase-Activated Protein Kinase C Signaling Pathway in Microglia." J.Neurochem.(印刷中).
-
[Publications] Murakami,N.他: "An association study of a polymorphsim of non-erythroid α-spectrin gene with schizophrenia." American Journal of Medical Genetics.(印刷中).
